大气细颗粒物的染色体损伤作用的探究.pdfVIP

大气细颗粒物的染色体损伤作用研究 王秦黄宁华常君瑞徐东群3 (中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所，北京，100021) 摘要：目的 探讨长时间接触大气细颗粒物对染色体的损伤作用。方法对大鼠进行气管滴入细颗粒物 混悬液，每周一次，共进行了6个月。采用传统微核实验方法检测细颗粒物所致大鼠染色体损伤作用。 结果在一定的浓度范围内，随浓度增加，细颗粒物可引起大鼠胸骨骨髓嗜多染红细胞微核率的升高， 并有～定的剂量一反应关系。结论长期接触大气细颗粒物可致大鼠染色体损伤。 关键词：细颗粒物气管滴入微核实验 的吸附能力，可携带多种有毒有害物质，而且在空气中悬浮时间长，易被吸入人体呼吸道深部，在肺泡 内扩散而沉积下来，甚至直接进入血液，长期接触可影响机体健康n’21。 国内外对细颗粒物遗传毒性的研究正逐渐深入璐一引，从染色体、DNA、基因等不同遗传物质水平表 明PM2．。具有～定的遗传毒性。在这些研究中，以体外细胞和短期的动物实验为主，多提取细颗粒物中的 些组分的遗传毒性，并不能完全反映Pll：．。的整体毒性。同时，由于人体对于细颗粒物的接触是～个长期 的过程，在动物实验中延长染毒时间以研究其效应，可能会对细颗粒物的遗传毒性有更深入的了解。 本研究以北京市城区某地作为采样点，采用气管滴入染毒的方式，在长时间接触的情况下，对大气 中细颗粒物的遗传毒性进行了研究。 1．材料与方法 1．1细颗粒物采样及处理 细颗粒物采样点位于北京市区北二环和三环路之间，采样高度约40米。采样前将玻璃纤维滤膜置 于马弗炉中550℃烘烤4小时，然后在室温和相对湿度40％的干燥器中平衡24小时。采样时记录温度、 湿度和大气压。采样后带回实验室放入干燥器中平衡24小时后称重，然后将滤膜装袋在一204C冰箱 中保存。采样时间为2004年3月’11月。 染毒前将采集有颗粒物的滤膜剪成lcm2小块，浸于冷的三蒸水中超声震荡30分钟，洗脱颗 后，收集离心管底层颗粒物，并吸取上清液继续用于离心。将浓缩的上清液及所有收集的底层颗粒物 合并真空冷冻干燥，一20℃冰箱保存备用。染毒时称取一定量细颗粒物粉末，用灭菌生理盐水配成 不同浓度的悬浮液，超声震荡5分钟，使颗粒物混匀。 1．2实验动物选择与分组 照(环磷酰胺，lOmg／m1)，每组18只大鼠。 1．3染毒时间及剂量 处死6只，每次共处死30只大鼠。 1．4微核试验 细胞，共记数1000个，观察含有微核的嗜多染红细胞数，以微核率(‰)表示。 1．5统计处理 3通讯作者，本项目由国家自然科学基金资助 ．183． 进行方差分析。 2．结果 2．1染毒过程中大鼠的基本情况 气管滴入后由于尚处麻醉状态，大鼠精神状态不佳，不喜动。过1~2小时后大部分恢复正常，但饮 食较少，一般在染毒后第2天转为正常饮食、活动。染毒期间，各组大鼠体重均随染毒时间的延长而增 长，但细颗粒物和阳性对照组大鼠增长速度比阴性对照组缓慢，甚至某些时刻出现体重减轻的现象(见 下图)。染毒后的大体解剖可见，细颗粒物组中大鼠肺组织弹性逐渐变差，质地逐渐变硬：颜色由粉红 色逐渐变为灰粉色；肺表面黑色颗粒物的灶状沉积逐渐增加，以双肺下叶多见，在最高剂量组黑色颗粒 物已布满全肺。 大鼠的时间一体重变化折线图(The of change the bodyweightduringexposuretime) 2．2大鼠骨髓微核实验结果 PM¨染毒对大鼠骨髓细胞染色体的损伤 Micronuclei insternum frequencies marrowcellsofrats toPM2 exposed 5 }与生理盐水组比较，PO．05；料与0．3mg组比较，PO05 由上表可见，同一实验剂量组不同时间段，随染毒时间的延长微核率逐渐上升，但生理盐水组上升