植物超氧自由基的化学清除和抗逆剂基础活性鉴定法研究.pdfVIP

·122· 中国化工学会农药专业委员会第十一届年会论文集 植物超氧自由基的化学清除与抗逆剂基础活性鉴定法研究 武振亮杨秀凤 (南开大学元素有机化学所，天津30007I) 摘要本研究依据植物保护酶SOD具有催化0：·一的歧化的至关重要的保护作用．遂以SOD的“激活” 和0z’的“清除”为关键指标t检测某些生长调节剂和其它物质对激活和清除的作用。发现S。，和PPⅢ 等三唑基类生鹾延缓剂具有更高的激活SOD的作用，PG和sA等外援自由基清除剂具有更高的清除0：· 的活性。由于所采用的NBT光化还原测定法反应敏感．适合于高通量快速测定化合物对离体SOD的激活 和对0：·一的清除作用，故本研究试图将该测定法发展为创新抗逆剂和抗衰老剂基础活性鉴定法。 本研究旨在借助植物抗逆生理研究中的经典研究法——NBT光化还原法fn，在离体 条件下，针对SOD的激活和O：·的清除这两个关键作用位点，对某些已知抗逆作用的物 质进行活性鉴定和评价．进而发展建立创新抗逆剂和抗衰老剂基础活性鉴定法。 1．材料和方法 1．1试材和药剂 小麦(Triticum aestivum)品种为温麦6号。 烯效唑(s。，)桔酸丙酯(PG)(用作标准药)等15种己知植物生长调节31(用作被检药)。 其通用名，分子式和有效成分如表1所示。 表1 供试化学物质 1．2酶液制备：剪取小麦幼苗第二叶0．29，放入冰浴研钵中，加入o．5mM冰冷磷酸缓冲液 (pH 7．0)匀浆，滤液在2C下15000xg离心20rain，上清液用于离体SOD活性测定。 1．3 I．4O：·清除作用测定：同上反应系统，不加酶液。以OD值计算NBT光化还原抑制率， 即对O，～的清除率(％)。 2．结果与分析 2 l药剂对SOD的激活作用 研究表明，S。，等8种生长调节剂(其中促进剂2种、抑制剂1种和延缓剂5种)xC,J、麦 叶片提取液离体SOD活性具有明显不同的激活作用(图1)。其差别按各被检药SOD最高 7％O 激活率及相应处理浓度从高到低的顺序是，So，(443pg／m1)、PPm(37．9％0．31ag／m1)、 BLT(35 中国化工学会农药专业委员会第十一届年会论文集 SADH(21．8％，30pg／m1)和CCC(3％，10099／m1)。 2．2 药剂对O，～的清除作用 研究表明，PG等9种生长物质(其中促进剂2种、延缓剂2种和自由基清除剂5种) 对O，一具有明显不同的清除作用(图2)。按其所处浓度范围和清除率，从高到低的顺序是 3～30I．tg／m1)为8～55％ S。、PP。和SB在各自处理浓度下清除率在1～8％，作用微弱。 ^ N - 坦 ．‘ 《 基蓐霉 喜-o}l二‘一_j，一‘ J 型 ．；；●口‘I ， 瞧 鼍 —：：口I ，7 ．，‘．￡，7 剿基兰丝 0 “0删 ，H 口 ÷I 口j I J J0 =D芸：{毒鲞兰垂塞垂垂羹支二= 口 。∞ 日【 eJ I j ．口 n 臻霉／o=．正‘．InJ Llnj