清营I号药物血清促血管内皮细胞增殖作用地研究.pdfVIP

全国中西医结合周围血管病专题研讨会 清营I号药物血清促血管内皮细胞增殖作用的研究 王健1鲁培基1奚丸一1王海杰2谭玉珍2 1上海市中西医结合脉管病研究所 2复旦大学医学院组织胚胎学系 【摘要】 目的：观察清营I号含药血清对 3．OKg。购自中困科学院上海实验动物中心。合 培养的HOVE细胞增殖的影响。方法：应用血清格证编号：中科动管003号。清营I号方(牛角 药理学方法和MTT法分FBS组、RS组、RDS组和片、益母草、大黄等，总重计45克)饮片，丹参 RQS组，每组分5％、10％和15％三种浓度进行 饮片(总熏训‘15克)由本院中药房提供。均按水 比较研究。结果：①在静脉注射药物衄清1h再以 提法[1]制各成注射液(含生药19／m1)。人脐静 相同剂量重复给药，RDS组和RQS组在2h时均能脉内皮细胞株复旦大学医学院解翻与组织胚胎学 达到最佳日、j相药物浓度，且有效应累加作用。② Rs组、RDS组和RQS组无细胞损伤作用。③购自上海实业生化试剂公司。MTT溶液的配置：将 同种浓度RQS组oD值明显高于FBS、RS、RDS各MTT用0．Olml／L 组：10％、15％浓度组明显高于5％的oD值。而除菌，放4℃冰箱内避光保存。 lO％、15％ROS浓度组与FBS、RS三种浓度组比1．2含药l缶清的制备 较，均呈显著性差异，15％RQS浓度组与10％RDS新西兰兔30只，分笼喂养1周后，随机分为 浓度组比较及10％RQS浓度组与5％RDS浓度组比 清营I号组，丹参对照组和空白对照组：清营I 较有统训学意义。结论：不同浓渡清营I号药物 号组、丹参对照组均按体型系数[2】折算兔用药 缸清与对照组比较，可明显增强血管内皮细胞活 量。经耳缘静脉缓慢注射，清营I号组于2h后， 力，促进血管内皮细胞增殖。 丹参对照组l h后分别将兔用3％戊巴比妥钠麻 【关键词】清营l号血管内皮细胞血清 醉后，腹主动脉插管取血，4℃冰箱过夜后， 药理学 2500rpm离心25mi n，拙取血清，经56℃水浴 血管内皮细胞不但是血液和组织之间的屏 30min灭活补体。0．22um滤器过滤除菌后分装， 障，而且可以分泌多种血管活性物质，在维持血 一20℃保存备刑。 管壁的完整性，调节血管能力，血小扳活化和聚 1．3人脐静脉内皮细胞株(ECV)培养及分组 集，血管壁霞塑等方面具有重要作用。血管内皮 ECV细胞采用含10％胎牛血清靖养液，5％C02饱 损伤，功能国家中医药管理局基金课题(97Y011) 和湿度、37℃培养箱内±直养。当细胞长至80％满 障碍是深静脉血栓形成发生的始动环节。清 时，甩0．25％胰蛋白酶消化，和O．02％EDT；％混 营I号由多昧中药组成的中药复方，已研究证实 合消化液消化静脉内皮细胞，收集细胞，离心 对深静脉血栓形成有明显疗效。本研究应用血清 1000r／min，1 0mji1。加入含有15％胎牛衄清 药理学方法观察清营I号古药血清对培养的人脐 (fetalboyiTie 静脉内皮细胞增殖的影响。 essential meditim)，混悬细胞。将细胞接种于 l材料与方法 96孔培养板，培养24h。当细胞生长接近形成单 1．1主要材料 层时，加入中药血清，继续培养24h。实验分FBS 健康新西兰兔30只，雌雄各半，体重2．5～组、正常兔血清(rabbit