羊栖菜多糖体外抗肿瘤作用与其诱导肿瘤细胞凋亡的研究.pdfVIP

离出内共生细菌，加以培养后，在其培养液中鉴定出石房蛤毒素，但有关的研究实质性进展很慢啪1。 七、塔玛亚历山大藻毒素潜在的开发应用价值 ‘ 塔玛亚历山大藻所产生的麻痹性贝毒素为钠离子通道阻断剂，是研究神经传导的重要工具药之一。 其作用机理和药理作用与河豚毒素基本相同，尤其是：受麻痹性贝毒素作用后的轴突比受河豚毒素作用 后恢复更快。麻痹性贝毒素的衍生物活性各不相同，其中石房蛤毒素具有比普鲁卡因或可卡因强10万倍 的局麻作用m1，具备开发成为高效局麻药物的巨大潜力；对癌细胞有选择性杀伤作用，既可作为治癌药 物，也可与河豚毒素组合形成系列产品。麻痹性贝毒素的成功开发应用，可望带来显著的社会和经济效 益。 八、结语 作为赤潮毒藻的代表性藻种之一，塔玛亚历山大藻越来越受到各国学者的重视，对其的研究已涉及 到从生态学、细胞学到分子生物学领域。可以预期，在不远的将来，随着对这种毒藻认识的进一步深入， 特别是其所含的麻痹性贝毒素药用价值领域的深入开发，在自然界中对其进行有效控制的同时可望实现 变害为宝，变废为益，带来良好的社会和经济效益。 参考文献(略) 羊栖菜多糖体外抗肿瘤作用及其诱导肿瘤细胞凋亡的研究 高世勇，季宇彬 哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站 羊栖菜(Sargassum 建、广东浅海域均有生长，日本和韩国也有Ⅲ。羊栖菜已作为中药“海藻”长期应用，能够软坚散结， 用于瘿瘤瘰疬、痰饮水肿等的治疗船1，民间也有用其治疗肿瘤的报道，疗效较明显。本草纲目》中也有 记载：“．…”主治瘿瘤结气，散颈下硬核瘤，痈肿徵瘕……， 疗皮间积聚暴溃，瘤气……”． fusiforme 由于传统中药剂型以水煎剂为主，而羊栖菜水提物有效成分中以羊栖菜多糖(sargassum 细胞凋亡的诱导作用以揭示其抗肿瘤作用机制。 1．材料 1．1药品：羊栖菜多糖：由哈尔滨商业大学药物研究所提供；羊栖菜购自哈尔滨市药材公司，并经 哈尔滨师范大学生物系鉴定；5-Fu上海制药十二厂，批号990601。 1．2试剂：RPMI -369· 人胃癌SGC一7901、人食管癌Eca一109均由中国医学科学院药物所提供。 1-4主要仪器设备：超速离心机OPTIMA XL-IOOK贝克曼公司；二氧化碳培养箱Form3121美国 培养箱 日本三洋公司；超净工作台Sw—CJ一2FD苏州安泰 2．实验方法 2．IMTT实验D川 用含10％胎牛血清的RPMI 1604培养液配成单个细胞悬液，以每孔1200个细胞接种于96孔培养板 中，每孔200PL。同时设溶剂对照，每个剂量设3个平行孔，常规培养24h后，加入受试药物，置37C， 参考波长630hm，计算对细胞抑制50％的药物浓度(IC釉)。 2．2集落形成实验D’51 小心浸洗三遍，lO％甲醇固定，15min后弃去固定液，0．25％龙胆紫染色，显微镜下计数大于50个细胞的 克隆数，对照组以培养液代替受试药物，结果以克隆形成率(％)表示。 克隆形成率=克隆数／接种细胞数×100％ 2．3流式细胞仪测定羊栖菜多糖对细胞周期及细胞凋亡的影响¨1 分为2组，即空白对照组和给药组，给药组药物终浓度为50“L／mL，对照组加入等量的培养液，给药后4， 胞凋亡情况。 APO％=凋亡细胞数／所测细胞数×100％ 3．实验结果 3．1羊栖菜多糖对几种肿瘤细胞株的杀伤作用 表1 羊栖菜多糖对6种肿瘤细胞株的抑制作用 3．2羊栖菜多糖对肿瘤细胞株集落形成的影响 ·370· 表2羊栖菜多糖对几种人肿瘤细胞株集落形成的影响(x±s．n=lO) 注：与空白对照组比木PO．05木婶O．Ol 3．3羊栖菜多糖对SGC一7901人胃癌细胞周期及细胞凋亡的影响 表3羊栖菜多糖对SGC-79