多羧基化合物的MALDI-TOF质谱的探究.pdfVIP

第24卷增刊 分析测试学报 VoI24 1竺!兰!! 些!型!!!竺!!!!!!!!!!竺!兰些竺竺!!竺坐竺! 垫!；型 多羧基化合物的MALDI—TOF质谱研究 赵镇文1，熊蕾2，辛斌1，胡伟华1，熊少祥“ (1中国科学院化学研究所北京质谱中心，北京100080；2．中闻科学技术大学化学系，安徽合肥230026) 本文利用MALDI—TOF MS在负离子模式下分析了含有多个羧基的化合物，基于MALDI—TOF 质谱分析中尚存在不少值得探讨的领域，实验着重以下两个方面：(1)如何选择基质；(2)基于实 验中基质的选择及样品的制备，可以得到什么结论?并且，通过利用MALDI—TOFMS分析多羧基 的化合物，期待对MALDI的去质子化的机理获得进一步的认识。 1 实验部分 所用仪器为BIFLEXⅢ型MALDI—TOF质谱仪(Bruker 长337 Hill，采用延时引出和反射的工作方式。加速电压19kv，反射器电压20kV，延时引出电压 14，5～16．5 kV，负离子检测，累加40～60次单次扫描信号得到质谱图。 USA)、2，5-dihydmxybenzoic 纯化。多羧基化合物样品由本所有机实验室合成与分离纯化，它们虽然是不同类型的化合物，但它 们的结构中，均含有多个羧基的共同点。实验时采用干滴法制样，即基质与样晶化合物分别配置成 lo及1弘g／IxL的溶液，吸取I汕的基质溶液和各1“的样品溶液，充分混匀，吸取0．5IxL的混 合液滴在干净的不锈钢样品靶上，待溶剂自然挥发样品结晶后，即制得待分析样品，送入质谱仪， 进行质谱分析。 2结果与讨论 由予样品化合物结构中存在多个羧基，是酸性化合物，首先选择了碱性基质3-AQ，希望3-AQ 基质中的氨基可以直接与样品化合物的羧基生成羧酸胺盐，从而样品在溶液中就已经被离子化，在 做质谱时，很容易得到样品的负离子信号。此时，去质子化的机理应该是一个在液相中简单的氢质 子转移反应。用3一AQ基质得到的4个样品的质谱图示于图1。可以看到，使用3-AQ作为基质进 行MALDI—TOF MS分析，均可以得到样品的去质子的准分子离子峰[M—H]一，但同时，也发现了 这个峰，是由于不纯的溶剂与样品中Na+的存在及Na+与羧基中H+的交换反应。样品2用KOH沉 (m／z1 1 845．4)及[M：+2K一3H]一(m／z883．4)的存在。对于这两个样品而言，使用3-Aq作为基 质，获得的谱图基本上与我们的期待一致，与这两张谱图相比较，样品3与样品4的谱图(分别对 应图1c与图1d)就复杂得多。在样品3的质谱图中，除了样品的准分子离子峰，包括去质子离子 [M，一H]一(m／z555．1)、钠离子加合峰[M，+Na一2H]+(m／z577．1)、钾离子加合峰[M，+K一 2H]一(m／z 峰，可以得知，基质3-AQ与样品发生了系列反应导致了新化合物的生成，从而在质谱图中出现了 这些新化合物的质谱峰。同样地样品4也发生了相似的反应，导致了谱图的复杂化。 通常，我们选择酸性基质解吸碱性样品，碱性基质解吸酸性样品，然而在这个实验中，碱性基 质3-AQ解吸酸性的多羧基化合物却不是理想的基质。进一步的实验结果表明：DHB是分析多羧基 化合物的最佳基质，而且，在DHB基质溶液中加入了等摩尔的氨水，NH，·H：O与DHB形成离子 液体，使其与样品的混合结晶在靶上分布变得均一，避免了“甜点”现象，节省了时间，离子信号 明显变强。 本文实验结果表明：DHB是解吸多羧基化合物合适的基质，多羧基化合物去质子化的机理比较 复杂，不同的样品处理方式可能有不同的途径。不同基质的作用也不可能相同，而加有氨水的DHB 一15— 第24卷 分析测试学报 增刊 基质最为理想。由此可知，离子化试剂是非常重要的，样品制备时应该给予更多的关注。 、 娜姗㈨