反相离子对色谱研究铝和儿茶酚胺的相互作用.pdfVIP

A5l 反相离子对色谱研究铝与儿茶酚胺的相互作用 练鸿振毕戴翔1邹公伟1毕树平1，+田笠卿2 (1-南京大学化学系。南京，210093；2．南京大学现代分析中心。南京，210093) 摘要：用反相离子对高效液相色谱法初步研究了铝与儿茶酚胺的相互作用，结 果显示，去甲肾上晾素的峰高随加入铝的增加而线性下降，铝与去甲肾上腺素的 配位比为1：1．谊项研究为进一步活体测定铝提供了一条新丝路． 荚键词：铝；儿荼酚胺；高效液相色谱 铝广泛存在于自然界．酸雨将矿物状态的铝溶解后散布于土壤中，使进入水体的自由铝 浓度升高，人们在生活中也不可避免地接触和吸收铝。人体内摄入过量的铝将带来严重的后 果，可以诱使或促进阿尔菠海熟症、帕金森症和透析脑症的发病[1】，在这些疾病患者尸体中 均测得了异常高浓度的铝[R26t]。这是由于具有强烈神经毒性的铝可以穿过血脑屏障或伴随瞄 脊液生理循环，通过影响神经递质的分泌和传输而干扰神经系统功能，或促进产生自由基的 反应而造成神经细胞死亡pI。儿茶酚胺是一类参与神经传达的生理活性物质．铝在人脑中主要 存在于灰质中．与其中的神经递质，特别是儿茶酚胺类结合，影响它们的传输或分泌从而干 and 扰神经系统的功能。WangB锄ard”悃排阻色谱法研究了生理条件下铝与神经递质配合物 的分离及结合形态分析。我们9’也曾利用儿茶酚胺作电活性配体，示差脉冲伏安法间接测定了 生物样品中的铝。本文建立了研究铝与儿茶酚胺配位作用的用反相离子对色谱法。为利用人 体自身存在的配体进行铝的活体检测增加了一种方法选择。 1实验部分 1．1仪器与试剂 据处理机。 院)，多巴胺(DA，上海第十制药厂)。 1．2实验方法 l：2、l：l、2：1、4：1和8：1，取2．0m进柱．记录色谱图，以NA的峰面积对【Al计】：【NA】作图。 1．3色谱条件 nlnl j．d．X25 柱：YWG-18，10岬l，4．0cm；流动相：高氯酸一高氯酸钾水溶液([(：1047= O．05 nm。 mol／l，口H=2．5)；流速：1．Om1，min；紫外检测波长：280 2结果与讨论 2．1铝与NA的反应 NA与铝发生配位反应，随着AP的增加，NA的色谱峰逐渐减小．说明AI-NA的生成消 耗了NA．[AJ什】：【NA】比为l：1时，峰高达最低点，说明铝与NA的配合比为l：l。NA峰面积 的下降(△A)与加入的Al”浓度呈线性关系，这是利用儿茶酚胺间接测定铝的基础。 2．2 色谱条件的选择 本实验的目的是考察AD，NA、L-dopa和AD四种儿茶酚胺同时存在时与铝的相互作用， 实验条件选择时要兼顾它们的分离。儿茶酚胺的分子中含有羟基和氨基，用反相色谱柱分离， 酸性流动相可以抑制-OH的电离·加入离子对试剂能够避免_硼2在固定相上的不可逆吸附。 我们采用简单的酸性HClO．I-KCl04离子对对体系，无需添加有机调节剂．实现了四种儿茶酚 胺的清晰分离，分离效果主要取决于流动相的pH值。[oofl=0．05moPl时，pH大于3．0， 峰展宽严重，随着pH的下降，峰形得到改善，pH2．0．3．0时效果最好。另外．考虑到各种儿 茶酚胺在280 m。 nfH均有最大吸收，本实验的检测波长设定为280 2．3 结语 本实验用简单的色谱体系实现了四种儿茶酚胺的分离，并初步探讨了铝与NA的反应， 为利用儿茶酚胺为配体在活体中间接测定铝，探索铝的神经毒性机制建立良好了的基础。 爹芍=)(献： 【l】ExleyC．AIuminum [2】PerlD TGibbsC P，GajdusekDC，GarrutoRM，YanagihavaRJ．Science【J1，1982，217：1053 [3】YokelRA，AlienDD，AcklyDC．J．1norgBiochem．加，1999,76：127． W，BarnardCLR．Anai．Pmc．【J】，1992。29：49． [4】Wang