恩诺沙星与其在鱼体内的代谢物环丙沙星残留研究.pdfVIP

2003’青岛·全国水产养殖研讨会论文集 恩诺沙星及其在鱼体内的代谢物环丙沙星残留研究 徐维海1朱校斌p林黎明2王新亭 (1中园科学院海洋研究所青岛266071) (2青岛出入境检验检疫局青岛266002) 摘要 研究恩诺沙星及其代谢产物在罗非鱼体内的分布与残留规律，确定消除半衰期。分析结果表明，恩 液中恿诺沙星含量均达到晟高t分别为3．61mg／kg、5．96mg／kg、l25“g／mL。在停药288h后。鱼肉 中恩诺沙星含量低于0．1 到最高0．223mg／kg。鱼肉中环丙沙星的残留量呈不规则变化，主要原因为环丙沙星在自身消除的 同时，恩诺沙星还在不断的代谢为环丙沙星。在停药21 1 6h后。鱼肉中环丙沙星含量低于0mg／kg。 关键词恩诺沙星，代谢物，环丙沙星，罗非鱼 实际水产养殖中由于忽略了养殖环境恶化和药物滥用的问题，从而造成抗菌药物、农药、重金 属等在水产品体内严重积累，特别是喹诺酮类、四环紊等抗菌药物的残留超标问题，已经引起世界 各国的关注。欧盟在2001年1月对我国的水产品实行全面禁运，直到6月才陆续开关，禁运期限 达6个月之多．给国家造成的损失近10亿元。恩诺沙星和环丙沙星是喹诺酮类药物的第三代产品 (即氟哇诺酮类药物)中典型药物．能与细菌DNA回旋酶亚基A结合．从而抑制了酶的切割与连 接功能，阻止了细菌DNA的复制，从而呈抗菌作用。对链球菌和表皮葡萄球菌有抑菌和杀菌作用， 抗菌力强，体内分布广，抑菌和杀菌作用迅速、彻底，在水产养殖中应用非常广泛，特别是鱼类养 殖中。恩诺沙星在水生生物中的代谢转化规律及残留研究还尚未见报道。本文研究了恩诺沙星在罗 非鱼体内的分布、转化和残留规律．确定药物的停药期，可以指导水产养殖合理用药，确保水产品 无药物残留，对保证人体健康。扩大我国水产品出口具有重要意义。 1材料与方法 1．1仪器和设备 Waters2695高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器和助湿箱：均质器(ULTRATURRAX)；氮气 浓缩装晟(PIERCEMODEL u 精确至0．019)：精密PH计：一次性注射器滤器；过滤膜(o．45m，DURAPORE)等。 1．2化学试剂与溶液 乙氰(色谱纯)：冰醋酸(分析纯)：磷酸(分析纯)：正己烷(色谱纯，经乙氰饱和)：三乙胺 50pg／mL的恩诺沙星和环丙沙星混合标准溶液(溶剂为乙氰，并根据实验需要稀释至一系列浓度)； 1 3 实验动物与养殖条件 吉富罗非鱼购自国家级青岛罗非鱼良种场，体重200～2509．在中国科学院海洋研究所水族楼 暂养一个月，水温27～29℃，充气，每日更换1／3水体。 1．4药物处理及取样方法 药物的配制：称取3．69恩诺沙星原粉、12009饵料和l809面粉混合后制成药饵。 ————一—— 一一一 !!塑：壹曼：全里查主鲞堕堑堡垒堡塞篓 给药方式：每天按J．5涮鱼缮重投喂药饵，任其自由摄食。空白组投喂无药物饵科。 液进行溅定(每三条作为一组)。 1．5药物的提取方法 准确称取49的鱼肌肉和肝脏、量取一定体积的血液分别放入50mL塑料离心管中，加入 25mLI％醋酸乙氰溶液重复提取一次，离心，合并上清液，在分液漏斗中加入25mL乙锇饱和正己 气吹干。加入1．5mL流动相，快速混匀后置于超声波池中超声lmin，移至lmL～次性注射器中， 通过0．45 pm膜过滤到液相进样瓶中．待测。 1 6 色谱条件及工作曲线 色谱条件： 工作曲线：取一系列标准混合溶液．在上述色谱条件下检测药物含量，作出标准曲线．在0、lOug／mL 39× 102+3 范围内线性关系良好．思诺沙星和环丙沙星的标准曲线回归方程分别为Y一2．873X 10’x、Y一4．55X 10’