中性脂在维持小鼠正常肺组织结构中作用地研究.pdfVIP

首届中国西部营养与健康、亚健康学术论文汇编 1左6 中性脂在维持小鼠正常肺组织结构中作用的研究 练雪梅1李廷玉2Li Van3 Ou3 Yan93Cong Hong (1重庆医科大学营养与食品卫生学教研室2重庆医科大学附属儿童医院 3美国辛辛那提儿童医院肺生物学研究室) 摘要：目的探讨中性脂在维持肺的正常组织结构中所发挥的作用。方法以溶酶体酸性脂肪酶基冈敲除 小鼠(1al一／_)为模型，采用免疫组织化学的方法观察中性脂代谢被阻断的隋况下，小鼠肺组织的病理变化； 进而采用基因芯片技术筛选lal-／-d,鼠与野生型小刚市组织差异表达的基因，探讨中性脂代谢被阻断后 lal-／一小鼠肺病理变化可能的发生机制。结果1．1al-／一小鼠存在明显的随年龄增长而逐渐加剧的慢E掳市部 炎症表现：肺泡II型上皮细胞和巨噬细胞中J陡脂蓄积；肺泡区域中『生粒细胞浸润；巨噬细胞增生，泡沫样改 变；区域}生肺气肿和区域性肺组织细胞增生、组织重建并存，以及气道Clara细胞反应性增铷巴大。2．与组 织病理改变相—致的是，基因芯片检测结果提示：与炎症反应密切相关的细胞因子／化学因子如：IL-1B，IL-6 和1啊一Q，以及与肿瘤迁移、细织重建相关的间质金属蛋白酶(M咿)如：加VIP8，姗P9和～NPl2；的表达都异 常升高。结论中I蝴旨在维持肺稳态性、机体防御和损伤修复中发挥重要的作用。 关键词：溶酶体酸呦旨肪酶，中J性朗旨，基因芯片技术 呼吸道疾病至今仍然是儿童疾病的第一死因，临味上很多难治性肺炎和哮喘均与肺发育异常有关；与肺 发育不全以及早产儿呼吸窘迫症发生有关的肺泡表面活性物质的产生、在肺发育中的作用及其调控机理已成 为目前肺发育生物学研究的重点。对于肺泡表面活性物质，既往研究主要集中在肺泡表面活性蛋白 (surfactant protein，SP)和磷脂的生理功能七，对中性脂的研究甚少。1。 II 肺泡II型上皮细胞(alveolar type 5％一1096的表面活l生蛋白组成，具有降低肺表面张力、保持呼气时肺泡张开的作用。表面活性物质中80％的脂 质是磷脂，其中绝大部分是磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine，PC，又称卵磷脂)，尤其是二棕榈酰磷脂酰 的作用目前尚不清楚^。已知—些中性脂的代谢产物可以作为核激素受体，如PPARY的配体，从而作为转录 因子，在调控一些维持肺稳态I生和宿主免疫相关的基因(如细胞因子、化学因子，蛋白酶，结构基因)表达 中发挥重要作用_引。 胆固醇酯(cholesteryl 首届中国西部营养与健康、亚健康学术论文汇编 细胞膜表面低密度脂蛋白受体的作用下，与低密度脂蛋白(10w-densitylipoproteinreceptor，LDL)结合 acid 的CE和TG被转运至细胞溶酶体，被溶酶体酸陛脂肪酶(1ysosomallipase，LAL)水解生成自由胆固 醇(freecholesterol，FO、自由月匕肪酸(free fattyacid，阡A)和甘油，因此LAL御旨尉嗍中劣、艏 重要的作用。LAL是一种溶酶体脱氢酶，它在粗面内质网中合成，糖基化后转移至内质网管腔；在通过高尔基 体时，酶的前导序列被水解，LAL中的寡聚糖被修饰为甘露糖一6一磷酸；以此作为信号，新合成的LAL在甘 露糖一6一磷酸受体的作用下转运至溶酶体发挥作用“。。 在人类，LAL缺乏会导致两种疾病，即沃尔曼病(Wolman’sdisease)和胆固醇酯贮积病。沃尔曼病主 要表现为大量的脂质(尤其是甘油三酯和胆固醇酯)蓄积在肝、脾和淋巴结等组织导致肝脾肿大，患者一般 存活不到—年。胆固醇酯贮积病则主要表现为肝脏肿大，常伴发高脂血症和早发性冠瞒h51。 本课题组DuH等采用基因打靶的方法成功建立了LAL基因敲除的小鼠模型(1al-／一)：lal-／-小鼠出 生正常，能存活至成年期，具有生殖能力；纯合子lal一／-小鼠没有LALmRNA表达、蛋白质产生和酶