蛋白质的定量测定(一)——双缩脲法.pptVIP

蛋白质含量测定 引言：蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科最常涉及的分析内容，是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标，也是许多生物制品，药物、食品质量检测的重要指标。在生化实验中，对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析，则是经常进行的一项非常重要的工作。 目前测定蛋白质含量的方法有很多种，下面列出根据蛋白质不同性质建立的一些蛋白质测定方法： 物理性质：紫外分光光度法。 化学性质：凯氏定氮法、双缩脲法、Lowry法等。 染色性质：考马斯亮蓝染色法、银染法。 其他性质：免疫比浊法。 蛋白质的定量测定——双缩脲法 实验目的要求 1、学习分光光度法原理，了解分光光度计的结构。 2、掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理及方法。 3、了解标准曲线的制作方法及其在物质定量测定中的应用。 分光光度法原理 分光光度法，常被用来测定溶液中存在的光吸收物质的浓度，其基本原理是根据Lambert和Beer定律。 Lambert定律 一束平行单色光垂直照射于一均匀物质（溶液）时，由于溶液吸收一部分光能，使光的强度减弱，若溶液的浓度不变，则溶液的厚度愈大，光线强度的减弱也愈显著。 设：入射光强度为I0 L表示溶液的厚度（即光程） 出射光（透过光）强度为I 根据辐射能理论推导， I0与I