基于抗炎作用与当归芍药散抗AD与实验研究.pdfVIP

中国免疫学会中医药免疫分会 改变提供了～定的实验依据。实验结果也说明脾虚或感染状态均可影响小鼠正常的生理机能，使血液 中红细胞数量减少，血红蛋白含量降低，进而影响了体内氧及营养成分的运输，同时又可能进一步加 重脾虚状态或感染的病情。 从上述研究我们可以看出，脾虚小鼠在抗白念珠菌感染后期，Mo—Mm通过分泌细胞因子如IL-I 8，对清除体内的病原菌有着极其重要的意义。但我们同时也看到，在抗白念珠菌感染的过程中，大 量释放的IL一1 B又可引起局部或全身的炎症反应，造成小鼠的损伤。 基于抗炎作用的当归芍药散抗AD的实验研究 钟树志1，李乔2，马世平2☆ (1皖南医学院组织胚胎学教研室；2中国药科大学中药药理教研室) 中药复方当归芍药散出自金匮要略，本用以治妇人腹痛及诸疾痛，上世纪80年代以来，日本津村 顺天堂运用该方治疗老年性痴呆，并取得良好疗效。尽管此前诸多文献对其中机制进行了探讨，但其 海马内注射的诱导的AD大鼠模型的学习记忆能力和脑组织中促炎细胞因子的表达及神经损害，并考 察当归芍药散对其的影响。 l材料 1．1药品与试剂当归芍药散(DSS)方中各药均购自南京先声药业股份有限公司，并请中国药科大学 Rhizoma 18．29。复方按常规煎煮、浓缩、干燥制成浸膏粉，临用前用双蒸水配成相应浓度溶液，实验中所用剂 工生物工程技术有限公司(Sangon，上海)合成。 冻离心机(Sigma，美国)；DG3022A型酶联免疫检测仪(TharmoElectron公司，美国)；紫外凝胶成像系 统(S[O-RAD公司，美国)；琼脂糖水平电泳仪(南京科宝仪器研究所)。 1．3动物SD大鼠，雄性，体重280圭209，由中国科学院上海实验动物中心提供，动物许可证号 SCEK2003-0004。动物分笼饲养，保持12 h昼夜节律，室温224-I*C，自由饮水摄食。 2方法 2．1 mM A111142)寡聚体聚合物溶液的制备将A既1吨髂于104M的磷酸盐缓冲液(PBS；10 烈搅动36h，O．22Inn微孔滤膜过滤，分装，．20C保存，备用。 2．2双侧海马内注射Ap(1．42)诱导AD动物模型的制备、分组及给药SD大鼠适应环境一周后，腹腔注射 水合氯醛(325mg／kg)麻醉，脑立体定位仪固定头部，碘伏消毒，沿中线剪开头皮，充分暴露头骨。 距前囟-3．8 mm，中线旁士2．0mm，定位，牙科钻钻开颅骨。lO山微量注射器垂直缓慢进针，进针深度 为硬脊膜下2．5 mm，固定，缓慢注射，注射速度为0．33pl／min。每侧海马注射5山ADfl．421溶液；伪手术 6 第五届全国中医药免疫学术会议论文汇编 组大鼠注射5m无菌PBS。注射完毕，留针5min，缓慢退针。牙科胶封闭小孔。小心放回鼠笼保暖。 为防止切口感染，术后腹腔注射青霉素(40，000IU／kg)． 术后48 h，将双侧海马注射AIBo也、大鼠随机分为3组：DSS低、高剂量组；模型组。另取未手术 型组、伪手术组和正常对照组大鼠每天灌胃给予等量蒸馏水。连续2l天。 2．3Morris水迷宫实验参照文献实施llJ。 2．4被动回避实验参照文献实施12】。 2．5．1 RNA提取于行为学实验结束后，采用颈椎脱臼法处死大鼠，冰上迅速取出脑组织，分离海马组 织，取一侧用于提取RNA。将海马组织立即浸入装有lml Tfizol的匀浆器中，冰浴匀浆，将匀浆转入 75％冰预 溶于20ul ml DEPC水。取10pl总RNA样品，溶解于O．140．1％DEPC水中，混匀，以O．1％DEPC水为 样品浓度调至l珂山备用。 m 骤