二糖核苷类抗生素友菌素的生物合成研究.pdfVIP

第八届全国天然有机化学学术研讨会论文集 二糖核苷类抗生素友菌素的生物合成研究 张改云，李苏梅，牛四文，胡涛，肖毅，鞠建华，张长生’ 中国科学院南海海洋研究所，海洋生物资源．-q-持续利用重点实验室 中国科学院海洋微生物研究中心，广东省海洋药物重点实验室，广东广州 510301 +通讯联系人Email：czhang@scsio．ac．cn 友菌素(Amicetin)是第一个被分离出来的二糖核苷类抗生素，它能有效抑制革 兰氏阳性和阴性细菌(如结核杆菌等)，对鸡球虫病和肺结核病有一定疗效，并 具有抗病毒功能。友菌素的主要结构特点是以胞嘧啶为基本骨架，含有两个脱氧糖基 素家族成员的生物合成路径目前尚不清楚，尤其是二糖链的形成机制，以及末端氨 基酸的合成及其构效关系。我们构建了友菌素产生菌Streptomyces NRRL 2363的基因组文库，根据对氨基苯甲酸合成酶基因的保守序列设计简并性PCR 引物，获取筛选探针，从而成功克隆了完整的友菌素生物合成基因簇，其中阳性克隆 lividans TK64申异源表达可产生友菌素及其中间体。对 pCSG3104在Streptomyces pCSG3104进行了序列测定和生物信息学分析，结果表明：该阳性克隆中的插入片段长 度为37337 糖基转移酶基因amiJ和amiG)可能参与友菌素中的两个脱氧糖基的生物合成，3个基 可能与胞嘧啶的结构修饰有关，3个基因(非核糖体多肽合成酶amiT，酰基转移酶amiR 和丝氨酸羟甲基转移酶amiS)可能与末端氨基酸的生物合成有关，另外还包括1个调控 们对其中12个基因进行了灭活突变，确定了它们在友菌素生物合成中的相关功能。我 们也对一些生物合成基因进行了异源表达、蛋白纯化和体外生物化学功能方面的探索， 证实了保留型糖基转移酶AmiG的反应可逆性，同时具有一定的底物非特异性，能够接 受非天然底物NDP．葡萄糖，从而得到了糖基结构改变的友菌素结构衍生物。我们通过 本文的研究，基本上确认了友菌素的生物合成途径，同时获取了多个友菌素的新结构类 似物。