夏天无生物碱的高速逆流色谱分离纯化.pdfVIP

第38卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第6期 2010年6月 ChineseJournalof 783～788 AnalyticalChemistry DOI：10．3724／SP．J．1096．2010．00783 夏天无生物碱的高速逆流色谱分离纯化 王岱杰 刘建华 耿岩玲 王晓+ 段文娟 傅茂润 (山东省科学院山东省分析测试中心，济南250014) 摘要采用pH一区带精制逆流色谱与常规高速逆流色谱相结合的方法快速分离纯化夏天无总生物碱。利 用pH．区带精制逆流色谱对夏天无总生物碱进行分离，以正己烷．乙酸乙酯一甲醇一水(5：5：2：8，WV，上相加 5 mmol／L mmoi／L三乙胺，下相加5 Hcl)为溶剂系统，上样量3．0 g，分离得到1个混合物和3个高纯度的生 物碱单体：原阿片碱(375nag)、苏元胡碱甲(362mg)和比枯枯灵(246mg)，其纯度分别为97．5％，95．6％和 97．1％。所得混合物850nag经常规高速逆流色谱二次分离，以正己烷．乙酸乙酯-甲醇．水(1：0．8：1．1：1， v／v)为溶剂系统，得到比枯枯灵(105mg)和四氢巴马亭(470nag)单体，纯度分别为99．1％和99．7％。从该 药材分得苏元胡碱甲，两种制备分离模式相结合，提高了夏天无生物碱的分离效率。 关键词夏天无；pH-区带精制逆流色谱；高速逆流色谱；生物碱 1 引 言 行气止痛的功效，主要用于治疗中风偏瘫、跌扑损伤、风湿性关节炎、坐骨神经痛等…。夏天无的主要 J。建立主要活性成分的分离制 活性成分为生物碱类化合物，如原阿片碱、比枯枯灵和四氢巴马亭等旧f3 备方法，对夏天无药材及其产品的质量控制十分必要。传统的柱层析方法存在耗时长、容易造成样品的 不可逆吸附、变性及样品回收率低等缺点。高速逆流色谱(HSCCC)是一种不用固态载体的液一液分配 色谱，它根据样品在两相溶剂中分配系数的不同实现样品的分离，可有效避免因不可逆吸附引起的样品 是在HSCCC基础上发展起来的特殊分离制备技术，依据化合物的解离常数(疋)和疏水性的不同而实 现分离，适合于有机酸、有机碱制备性分离，具有制备量大和分离馏分高度浓缩纯化的特点一J。本研究 采用pH．区带精制逆流色谱结合常规高速逆流色谱对夏天无总生物碱进行分离纯化，快速分离制备出 4个高纯度的生物碱单体：原阿片碱、苏元胡碱甲、比枯枯灵和四氢巴马亭(结构见图1)。 魄蓬飞 A 苏元胡碱甲Humosine 比枯枯灵Bicuculline四氢巴马亭Tetrahydropalmatine 原阿片碱Protopine 图l 夏天无中分离出的化合物结构式 Chemicalstructureof from Fig．1 compoundsseparatedCorydal蠡decumben,(Thunb．)Pets． 2 实验部分 2．1仪器、试剂与材料 GSIOA高速逆流色谱仪(北京新技术研究所)；S系列柱塞式泵(北京圣益通技术开发有限公司)； 2009．10-30收稿；2010-01-26接受 }E-mail：wangx@keyhb．net 万方数据 分析化学 第38卷 Varian 100Series6320 INOVA-600核磁共振波谱仪(美国Varian公司)；1 ion—trap电喷雾离子阱质谱仪