磁微球固定过氧化物酶催化光度检测过氧化氢.pdfVIP

第 10卷第6期 江 南大 学 学报(自然科 学版) Vo1．1O O．6 2011年 12月 JournalofJiangnanUniversity(NaturalScienceEdition) Dec． 20l1 磁微球固定过氧化物酶催化光度检测过氧化氢 柯叶芳， 李在均 (江南大学 化学材料与工程学院，江苏无锡 214122) 摘 要：采用化学共沉淀法制备FeO，将正硅酸四乙酯水解在Fe0 粒子表面制得FeO／SiO：核 壳磁微球，制备好的微球经红外光谱、x射线粉末衍射和磁强计考察其结构和磁性。在微球表面用 3．氨丙基三胺 乙基硅烷修饰上氨基，经戊二醛活化 以偶联的方式将过氧化物酶固定在磁微球上。 固定后的酶催化过氧化氢的同时使氨基二乙基苯胺硫酸盐显色，产生的有色物质在551nm处有最 大吸收，以此建立检测过氧化氢的方法。结果表明，包裹SiO 层的磁微球不改变其核的结构，磁性 降低但是不改变超顺磁状态。在最佳条件下，过氧化氢的线性范围是 1．29～64．5~mol／L，检出限 为8．5×10～mo1／L。固定后的酶可反复使用5次，放置于4qC至少两个月不影响催化效果。 关键词：磁微球；过氧化物酶；过氧化氢；分光光度法；氨基二乙基苯胺硫酸盐 中图分类号：O657．7 文献标识码 ：A 文章编号：1671—7147(2011)06—0726—05 PeroxidaseImmobilizedonMagneticM icrosphereforCatalyzingand DetectingHydrogenPeroxidebySpectrophotometer KEYe—fang， LIZai-jun’ (SchoolofChemicalandMaterialEngineering，JiangnanUniversity，Wuxi214122，China) Abstract：The Fe3O4 nanoparticles were obtained by the CO—precipitation method． We coated silica on superparamagnetic nanoparticlesby hydrolysisand the p0lycondensation oftetraethyl—orthosilicate．The magnetic microsphereswerecharacterizedbyfouriertransform infrared spectroscopy，X-raydiffraction andVibratingSample Magnetometer．Thesilicalayerwastestedbygrafting (3-aminopropy1)triethoxysilaneontothenanoparticles． Followingthis，thesurfaceofchemicallymodifiedmaghemitenanoparticleswasfurthersubjectedtoactivationwiththe crosslinker，glutaraldehyde．Then the peroxidase fixed on magnetic beads． The immobilization peroxidasewas preparedandusedforthedeterminationofhydrogenperoxide．ItwasabletoabletoactivateH2O2andoxidizeN， N-diethyl-p—phenylenediaminesulfatetoacoloredproductwithastrongabsorptionm~ imum at551am．Theresults showthatthemagnetic microspherescoated bySiO2layermaintainedtheirnuclearstructure，reducedbutdid not changethemagnetic supe