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第七章 基因重组育种 绪 论 基因重组广义而言是指基因型不同的个体交配产生不同于亲本基因型的个体。随着人们对工业用菌的无性生活史的研究逐渐深入，发现一些真菌和细菌只能通过准性生殖方式进行基因重组。 基因重组：由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合，形成新DNA分子的过程。 微生物性状改变是由于遗传物质的成分和结构的改变引起的。遗传物质的这些变化，可以由诱变引起，也可以通过杂交、转导、转化等手段引起，后三者通称基因重组。 微生物的基因重组分类: 通过双亲细胞的融合，涉及整套染色体基因的重组，如酵母和霉菌的杂交; 通过双亲细胞的沟通，涉及部分染色体基因重组，如细菌的杂交; 双亲细胞不接触，但涉及个别或少数基因的重组，例如受体细胞接受供体细胞内抽提的DNA而进行的基因重组称转化。若供体细胞的基因是通过噬菌体的携带转移到受体细胞中，由噬菌体的感染过程而进行的基因重组称转导。 第一节 工业微生物原核与真核的遗传系统 在无性细胞中所有的非减数分裂导致DNA重组的过程叫准性杂交 (parasexual)，这在原核生物和真核生物中均有存在。 在病毒中，异源菌株基因片段进行交换是在混合进入人到同一宿主后进行的。 一 原核系统 在细菌中准性杂交分为接合 (细胞融合之后重组)，转导 (通过噬菌体载体DNA从一个细胞转移到另一个细胞之后进行重组)和转化(分离得到的DNA进入细菌细胞中以后的重组)三种类型。 Gene recombination Transformation First reported by F. Griffith in 1928 on the infection of mice with streptococcus pneumoniae (attempting to develop a vaccine), extensive studied by O.T. Avery in 1944. The pneumococcus transforming principle is DNA Striptococcus sp, Haemophilus influenzae, Bacillus sp can uptake DNA in nature Integrating into chromosome by recombination What F. Griffith has found in 1928 Injection of a little S cells (pneumococcus) into a mouse will kill the mouse in 24 hours or so. But an injection of over 100 million (10 x 106) R cells is entirely harmless. Can it be an artifact? Artificial transformation Cell fusion with protoplast/spheroplast CaCl2/heat shock Lipid (polyethylenglycol) Electroporation Conjugation F factor: the plasmid High-frequency recombination donors Transduction Two types of transduction Generalized transduction - all regions of chromosome transduced, only chromosomal DNA (i.e., no phage DNA) in transducing particles. Specialized transduction - only specific regions of chromosome located near attachment site are transduced, transducing particles carry both chromosomal DNA and phage DNA. 二 真核系统 在真菌中，菌丝融合或胞质融合形成一个双核体之后，单倍体的核进行核配。DNA的重组一般发生在减数分裂期，在这之后形成单倍体。在高等植物或动物的细胞融合之后进行组织培养时也会发生这种重组。 酵母菌 酵母菌有多种繁殖方式，有人把只进行无性繁殖的酵母菌称作假酵母，而把具有有性繁殖的酵母菌称作真酵母。  1 繁殖方式： 分无性繁殖和有性繁殖两大类，主要是无性繁殖。 无性繁殖：包括芽殖 、裂殖 、芽裂繁殖和产生无性孢子 有性