实验八 凝胶过滤分离高铁血红蛋白与高铁氰化钾.pptVIP

了解凝胶层析的原理及应用 通过血红蛋白脱盐实验，初步掌握凝胶层析技术 凝胶过滤层析： 高铁血红蛋白分子量大(MetHb，红褐色，Mw=64500)， 完全排阻 钼酸铵 + 氨基萘酚磺酸 + 磷酸盐 层析柱稳定后接储液瓶，打开出口，用两倍于床体积的缓冲液洗脱平衡(5-10min )，不可露出床面，关闭出口 用洗耳球从层析柱下口慢慢将柱中的凝胶吹至小烧杯中回收 MetHb的相对分子量较大，直径大于凝胶网孔被完全排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间向下流动，流程较短，移动速度快，首先流出 向凝胶柱中加入样品时，为什么必须保持胶面平整？上样体积为什么不能太大？ 请解释为什么在洗脱样品时，流速不能太快或太慢？ 圆盘电泳的分子筛效应和凝胶过滤的分子筛效应原理上有何不同？ 实验项目 实验原理 试剂和器材 操作方法（主要步骤） 结果分析 思考题 实验九 酶法测血清葡萄糖 生物化学与分子生物学实验 实验八凝胶过滤分离高铁血红蛋白与高铁氰化钾 实验目的 是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离，也称分子筛层析、排阻层析 实验原理 单个凝胶珠本身象“筛子”。不同类型凝胶的筛孔的大小不同。 交联葡聚糖的凝胶颗粒 分子筛效应：