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嘌呤核苷酸对海洛因处理过大鼠C6神经胶质瘤细胞增殖的影响_临床医学论文 嘌呤核苷酸对海洛因处理过大鼠C6神经胶质瘤细胞增殖的影响_临床医学论文 作者：李鸿梅 李昆 何海涛 刘剑凯 洪敏 【摘要】 　　目的 探讨海洛因及嘌呤核苷酸对大鼠 C6 神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法 体外培养大鼠 C6 神经胶质瘤细胞，分别以不同浓度的海洛因及嘌呤核苷酸处理细胞，MTT 比色法检测海洛因和嘌呤核苷酸对细胞增殖的影响。 结果 MTT 实验表明，海洛因对大鼠 C6 神经胶质瘤细胞的增殖有抑制作用，120 mg/L海洛因作用 24 h对 C6 细胞的抑制率达 52%，并表现为剂量依赖性；嘌呤核苷酸对 C6 细胞的增殖有促进作用，120 mg/L嘌呤核苷酸作用 24 h，细胞增殖率为 30%，并表现为剂量依赖性。结论 海洛因抑制大鼠 C6 神经胶质瘤细胞的增殖；嘌呤核苷酸促进大鼠 C6 神经胶质瘤细胞的增殖，并在某种程度上对抗海洛因对 C6 细胞增殖的抑制作用。 【关键词】 嘌呤核苷酸；海洛因；神经胶质瘤细胞；细胞增殖。 【Abstract】Objective To investigate the effects of heroin and purine nucleotides on the proliferation of C6 glioma cells. Methods The effects of heroin and purine nucleotides on the proliferation of C6 glioma cells were evaluated by MTT assay. Results Heroin inhibited the growth of C6 glioma cells in vitro，52% C6 glioma cells were inhibited when the cells were treated with 120 mg/L heroin for 24 h；purine nucleotides promoted the proliferation of C6 glioma cells，30% C6 glioma cells were promoted when the cells were treated with 120 mg /L purine nucleotides for 24 h. Conclusions Heroin inhibits the proliferation of C6 glioma cells，purine nucleotides promotes the proliferation of C6 glioma cells. 【Key words】Purine nucleotides；Heroin；Glioma cells；Proliferation 　　由于大鼠 C6 神经胶质瘤细胞膜上存在阿片受体，目前已被广泛用作研究各种阿片类药物作用机制的模型系统〔1，2〕。本实验室研究发现，海洛因不但能够抑制大鼠 C6 神经胶质瘤细胞的增殖，而且还能使细胞内嘌呤核苷酸分解代谢增强〔3，4〕。已经明确的是海洛因对 C6 神经胶质瘤细胞的增殖有抑制作用，但是嘌呤核苷酸对经过海洛因处理过的大鼠 C6 神经胶质瘤细胞的增殖是否有影响并未见报道。本实验在前期研究发现的基础上，以大鼠 C6 神经胶质瘤细胞作为靶细胞，研究嘌呤核苷酸对海洛因处理的大鼠C6 神经胶质瘤细胞增殖的影响，探索嘌呤核苷酸治疗阿片类成瘾的潜在机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料和仪器 　　C6 细胞株购自上海细胞研究所。低温台式离心机购自上海化工机械厂。倒置显微镜购自上海蔡康光学仪器有限公司。CO2培养箱购自日本 SANYO 公司。超净工作台购自苏州尚田洁净技术有限公司。DMEM培养基购自 Gibco公司，新生牛血清购自天津血液研究所。噻唑蓝 (MTT)、一磷酸腺苷 AMP 和一磷酸鸟苷 GMP购自Sigma公司。海洛因 (纯度为99% ) 由吉林省公安厅提供，临用时用灭菌三蒸水溶解。 　　1.2 大鼠 C6 神经胶质瘤细胞培养 　　C6 为贴壁生长的细胞。培养基为 DMEM，每100 ml培养基含青霉素 1 万U，链霉素10 mg，新生牛血清 15 ml，用灭菌的 5.6% NaHCO3 溶液调 pH7.2，置于 CO2 孵箱，37℃、5% CO2 条件下培养。细胞生长至近融合状态时，用 0.25% 胰酶消化传代，每周2～3次。 　　1.3 MTT 比色法检测海洛因对 　　C6 细胞增殖的影响及最佳药物剂量筛选 将处于对数生长期的细胞，用0.25%胰酶消化，用吸管将细胞吹打成单细胞悬液，血细胞计数板计数；将