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大鼠慢性脑灌注不足时的运动诱发电位_临床医学论文 大鼠慢性脑灌注不足时的运动诱发电位_临床医学论文 作者：宁宁 赵士福 成戎川 梁伟华 【摘要】 　　目的 制备大鼠慢性脑灌注不足模型，观察运动诱发电位(MEP)变化，研究慢性脑低灌注对脑传导功能的影响。方法 采用双侧颈总动脉结扎制作慢性脑灌注不足动物模型，实验分为对照组、缺血半月组、缺血1月组和缺血2月组共4组。使用电刺激诱发，双下肢记录，刺激电极放于皮层运动区，记录电极置于对侧腓肠肌，记录皮层MEP，观察潜伏期和波幅变化。结果 慢性低灌注期MEP潜伏期显著延长(0.01)，并随低灌注持续时间延长而出现MEP潜伏期延长更为明显。结论 慢性低灌注可以引起脑内传导功能受损，临床上MEP可用来反映慢性脑灌注不足后轴索的功能状态。 【关键词】 运动诱发电位；慢性脑灌注不足；大鼠 　　慢性脑灌注不足(CCH)在老年个体中普遍存在，是导致老年期认知障碍和运动障碍主要原因，长期反复损害易导致血管性痴呆，而传导功能损害是其重要机制之一〔1〕。本实验采用双侧颈总动脉结扎法制备大鼠CCH，对缺血不同时间进行运动诱发电位（MEP）检测，观察反映轴索传导功能改变的MEP变化及规律，来证明了慢性低灌注是白质传导、传输功能下降重要因素，为预防慢性低灌注状态提供新的途径。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物及分组 　　选用纯种健康Sprague大鼠24只(第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心提供)，2～3月龄，雌雄不限，体重200～250 g。自由饮水，普通颗粒型饲料饲养，温度控制18～26℃，光暗周期12 h。将24只SD大鼠随机分为对照组(n=6)、缺血半月组(n=6)、缺血1月组(n=6)和缺血2月组(n=6)。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 模型制备 　　动物模型参照Ohta等〔2〕制作慢性脑灌注不足动物模型。大鼠术前12 h禁食，4 h禁水。用10%水合氯醛腹腔麻醉，400 mg/kg，保证手术操作期间大鼠有自主呼吸。仰卧固定，颈前部去毛消毒后沿颈正中切开，分离出双侧颈总动脉，双重丝线结扎。术中大鼠肛温保持在36.5～37.5℃，手术后动物被送至通风和有空调的房间饲养。对照组仅切开颈前，不结扎颈总动脉。 　　1.2.2 经颅电刺激和记录 　　采用丹迪公司Keypoint四导诱发电位仪记录。大鼠MEP在安静的电屏蔽室(室温20～24℃)内记录。10%水合氯醛40 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠。电极选用EEG 针电极，刺激电置于大鼠前囟后方1 mm皮下，参考电极于矢状缝旁3 mm，记录电极在对侧腓肠肌，鼻部电极针接地。电刺激信号为单个方波电脉冲，刺激强度5～12 mA，波宽0.2 ms。每个结果至少重复2次以获得稳定的波形。 　　1.3 信号分析及统计学处理 　　对不同组间潜伏期均数进行比较，采用两样本均数t检验； 3组以上成组资料均值比较采用完全随机的单因素方差分析。应用SPSS11.0软件进行数据分析，定量数据均以x±s表示。 　　2 结果 　　2.1 行为学观察 　　双侧颈总动脉完全阻断后首先出现短暂惊厥，体温降低，呼吸减慢，翻正反射消失；术后早期观察动物运动减少，后肢呈“八字”，走路共济失调，或爬行和转圈；术后7 d手术组已基本恢复，无明显的运动障碍。摄食饮水均与建模前无显著差异。 　　2.2 对大鼠活动的大体观察 　　大鼠在电压超过2 V出现整个头面部肌肉收缩运动，6 V以上头可产生移位，所有大鼠完成刺激后无死亡及活动异常。 2.3 MEP变化 　　2.3.1 波幅变化 　　刺激阈值强度约为5～10 mA时，首先出现的是MEP的早期成分(潜伏期lt; 10 ms)，包括3～4个负向波，以前两个波最为明显；晚期成分潜伏期约为14 ms左右，时程较宽、波幅较小而且不太稳定；大于40～50 mA为超强刺激，潜伏期和波幅不再有明显改变；随着刺激强度逐渐增加，波幅逐渐增加，见图1。 　　2.3.2 潜伏期变化 　　制模后半个月，实验组大鼠左、右MEP潜伏期较对照组显著延长，具统计学意义(0.01)。实验组大鼠自身左右侧比较无统计学意义(Pgt;0.05)，对照组大鼠自身左右侧比较无统计学意义(Pgt;0.05)；制模后1个月，实验组大鼠左、右侧潜伏期较对照组延长，具统计学意义(0.01)。实验组及对照组大鼠自身左右侧比较无统计学意义(Pgt;0.05);制模后2个月，实验组大鼠左、右侧潜伏期较对照组大鼠延长，具统计学意义(0.01)。实验组及对照组大鼠自身左、右侧比较无统计学意义(Pgt;0.05)；对照组、术后半个月组、术后1个月组、术后2个月组大鼠左、右侧两两比较潜伏期均具统计学意义，潜伏期逐渐延长(0.01)，见表1。 表1 各组双下肢MEP潜伏期(略) 　　3 讨论