水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)的快速检测.pdfVIP

江苏农业科学2012年第40卷第1期 一255一 黄玉柳，黄国秋，叶欣宇，等．水产品中麻痹性贝类毒素(PsP)的快速检测[J]．江苏农业科学，2012，40(1)：255—256 水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)的快速检测 黄玉柳，黄国秋，叶欣宇，黎小正，吴祥庆，庞燕飞，谢宗升，陈静 (广西水产研究所，广西南宁530021) 摘要：介绍了美国ABRAxIs麻痹性贝类毒素试剂盒的测定原理和测定方法，应用该试剂盒对广西钦州和防城港 海域近江牡蛎样品各20个、北海海域文蛤样品20个，进行麻痹性贝类毒素检测。应用酶联免疫试剂盒检测麻痹性贝 类毒素，全部试验过程在2h内完成，检测限o．02 ng／g，灵敏度为o．015ng／g。应用EusA法检测麻痹性贝类毒素，具 有简便、快捷、灵敏、成本低廉等特点，非常适于快速检测的实际需求，有望作为理想的筛选分析方法之一，在水产品质 量快速检测、养殖区染毒情况调查以及上市贝类质量监控方面发挥重要作用。 关键词：麻痹性贝类毒素；酶联免疫；食品检验；小白鼠生物法 ‘ 中图分类号：R446．62文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2012)01一0255一02 麻痹性贝类毒素(PsP)是指存在于贝类体内、化学结构1．2样品来源 分别采集广西钦州和防城港海域近江牡蛎各20个、北海 以石房蛤毒索(sa]【itoxin，s7Ⅸ)为代表、摄食后可产生麻痹作 用的海洋生物毒性物质的总称，主要是由甲藻类中的亚历山 海域文蛤样品20个，共60个。采样后立即放在冰排中保存， 送回笔者所在单位中心实验室检验。 大藻(A玩口砌百Mm)以及膝沟藻属(GD，磅，ⅡⅡ如吼)、原甲藻属 1．3 方法 (P，orocen#mm)等一些形成赤潮的种类产生的一系列氨基甲 酸酯类衍生物，是目前世界上分布最广、食物中毒发生频率最 1．3．1测定原理采用直接竞争EusA方法，用特异性抗 高、危害程度最大的一类毒素。目前国际上普遍采用小鼠法、 体识别石房蛤毒素。样本中的石房蛤毒素可与石房蛤毒素一 生物免疫法、色谱法和质谱法等手段来检测贝类并做出预警 酶结合物竞争，同包被在微孔板上的兔抗一石房蛤毒素抗体 预报‘1一“。 结合。石房蛤毒素抗体与包被在微孔底部的二抗结合，洗板 小白鼠生物法重现性差、灵敏度低、耗时长，且易受多种 后加入底物溶液，显蓝色。蓝色的深度与石房蛤毒素在样本 因素干扰而影响结果的准确性，在实际应用中受到很大限制。 中的浓度成反比。颜色反应在规定时间内终止，颜色用酶标 寻找简便、灵敏、可靠的赤潮毒素快速检测技术并用于水产品 仪读值。每孔的样本浓度值可以通过标准曲线来读取。 检验，是保障食用安全、有效控制赤潮毒素造成的影响、减少 1．3．2样品前处理 损失和及时了解水产品染毒情况的迫切要求。近年来，利用 1．3．2．1肌肉前处理方法l(稀释倍数为1：2Ooo) Immunosorbent 抗原抗体结合的酶联免疫法(EnzyIne一“nked (1)除去贝壳，用双蒸水洗净贝肉后均质器均质。 (2)称取10 mL80％o．1moL／L Assay，EusA)在海洋生物毒素检测方面得到了迅速发展，并 g均质后的样品加入10 有多种可靠的诊断试剂盒用于分析不同毒素，特别在定性定 Hcl，煮沸5min，边煮沸边搅拌。 500 nlin。 量初筛检