接枝酪蛋白为载体的葡萄糖酶微电极地研究.pdfVIP

接枝酪蛋白为载体的葡萄糖酶微电极的研究 魏波，刘剑洪，吕玉娟，张黔玲，张培新，杨慧宁 深圳大学师范学院化学和生物系深圳518060 第一个葡萄糖生物传感器u·。随后各类生物传感器，通过固定酶、微生物等具有分子识别功能的生 物活性物质，被不断地开发和研制弘”。酶电极凭借其简单、灵敏、快速和高选择性等特点，成为生 物传感器领域的研究热点o”】。近年来，有关葡萄糖酶电极研究成果层出不穷。而且，许多被用于临 床诊断和工业在线分析“”“。制备酶电极的关键问题是酶的固定。由于酶是两亲化合物，相对来说 交联技术在保证酶活性、响应时间和电极稳定性等方面更占优势。本文研究了以接枝酪蛋白为载体， 戊二醛为交联剂，成功地制备了一种葡萄糖氧化酶电极。该电极具有较好的稳定性和使用寿命；而 且操作简单，成本低，对于常规的葡萄糖测定不受时间和地点的限制；有望用于实物样品分析。 枝聚合。最后，在一定的恒电位下，通 过电解吸附，与戊二醛交联，制备出葡 萄糖氧化酶电极。用电化学工作站，测 定恒电位下定量加入葡萄糖所产生的电 流值。 实验结果表明，温度对于酶电极的 性能来说是一个重要的影响因素。当温 度处于350C一45℃之间时，温度对电极 的响应影响较小。不同pH值对酶电极 一，8．一_)Q∞口oa∞譬甚e3u 的影响如Fig．1，在pH6．0—7．0时，电 极响应达到最大，最适pH值为6．0—7．0。 pH Influenceof substratesolutionthe 是 Fig．1 on electrode Fig．2 在pH=6．5 pH Na2HP04-NaH2P04的缓冲溶液中，扫描 速度为100 mV／s，响应时间为10．03秒时所测得的峰电流与葡萄糖浓度关系曲线。线性范围为 1．2x10‘。1．2x10～mol／L，相关系数为0．9984。 根据电化学工作站给出的接 枝酪蛋白葡萄糖氧化酶电极的峰 电流与响应时间曲线可以看到，该 电极响应速度很快，仅为lO秒。而 且，该电极可以连续使用多次。这 说嬲该法制备的电极在稳定性和 响应时问方面效果较好。干扰实验 表明，以下化合物无干扰：Vitamin C(100倍)、Zn2+(500倍)、M92 +(500倍)、Fe3+(500倍)、乳 ^吁oo．_【一廿∞IIoQ∞o-苔∞_工I；u 糖(500倍)、蔗糖(700倍)、尿 素(700倍)。 Concentration(tool／L) 利用本文制备的葡萄糖氧化 Calibrationcurveofthe electrode Fig．2 enzyme 121 酶电极对玉米面、马铃薯粉和淀粉样品中的葡萄糖含量测试结果列于Tablel。说明该电极具有较好 准确度。 Tablel．Results of inreal glucosesamples 样品