基于SiO2溶胶-凝胶的电化学免疫传感器地研究.pdfVIP

第23卷 专辑 中 国 稀 土 学 报 2005年12月 V01．23 OF JOURNALTHECHINESE RAREEARTH Spec．Issue SOCIETY Dec．2005 基于Si02溶胶．凝胶的电化学免疫传感器的研究 李 丹。，张 玲，周琼花，陈 平，李玉云，丁 勇 (长沙理工大学化学-9环境工程系，湖南长沙410076) 吸附到电极的溶胶．凝胶表面，以对苯二酚为电子媒介物制备酶传感器用于测定H：O：，在最大H：02浓度响应下，用SiO：溶胶．凝胶结合抗体， 抗体再结合抗原，并将其用于固定含二抗的辣根过氧化物酶，以对苯二酚为电子媒介物制得用于测定免疫球蛋白抗原的电化学免疫传感器。 采用循环伏安法对传感器逐层修饰过程进行了表征，讨论了溶液pH值、抗体稀释度对电极性能的影响。结果表明，该方法能保持被固定蛋 白质分子的活性，增强了传感器的稳定性；该传感器在2．5×10～，12．5×10_5 g·L“免疫球蛋白抗原浓度范围内与电流响应值呈良好的线 性关系，检测限为2．0×100 g·L～，且响应迅速、灵敏度高、选择性好，在实际应用中结果良好。 关键词：溶胶．凝胶；辣根过氧化物酶；电化学免疫传感器 中固分类号： 文献标识码：A 文章编号：1000—4343(2005}一0083—05 生物传感器作为一种耐用、可携带、易操作、 定抗体、抗原及含二抗的辣根过氧化物酶，研制成 低成本的分析装置，是目前较为瞩目的开发研究 一种性能较好的免疫球蛋白抗原电化学免疫传感 热点¨]。由于生物传感器是以酶、抗体、受体等为 器。 分子识别元件，因此具有优良的选择性和识别性。 1 实 验 检测限低、价格低廉，已被广泛应用于生物、医 药、农业、食品和环境等各领域乜]。溶胶凝胶(S01． 1．1实验仪器及材料试剂 gel)技术是将金属醇盐等原料配制成均质溶液，在 含二抗的辣根过氧化物酶(HRP，250 饱和条件下经水解缩聚等化学反应，生成物聚集 u·mg一)，上海生物丽珠生物技术有限公司产品； 成溶胶，经蒸发干燥转变成凝胶，在低温下制备纳 抗体(冻干羊抗人IgG诊断血清)，上海生物制品研 米粉末或多孔玻璃的一种技术口“]。近年来，基于 究所制；抗原(免疫球蛋白参考血清)，上海生物制 溶胶．凝胶技术的有机／无机杂化复合材料由于具有 品研究所制；氨水(体积分数25．28％)、无水乙醇、 有机物的柔性和易修饰性，以及无机物的钢性和 正硅酸乙酯，分析纯；实验用水为二次蒸馏水；对 稳定性等，因此有利于保持生物分子的活性和生 苯二酚溶液用时现配。0．01mol·Lq的磷酸缓冲溶 物传感器的研制¨柚】。 液(PBS)由Na2HPO。和KH：PO。配制。 在工业、生物临床诊断和食品分析等领域， Model 283恒电位仪；SB220型超声仪；微量 H：O：的测定都有非常重要的作用。胃前，测定 进样器；电化学反应池为三电极系统，其中饱和甘 H：O：一般采用滴定、化学发光、荧光和电化学等 汞电极为参比电极，铂电极为辅助电极，石墨电极 方法，其中电化学方法相对比较灵敏、简便n0|。由 为工作电极，所有实验均在室温下进行。 于H：O：是多种物质在其专一酶催化作用下的产 1．2 Si02溶胶-凝胶的制备 物，因而测定H。O：的浓度也可间接检测各种目标 取100