超临界流体梯度结晶穿心莲内酯地研究.pdfVIP

第五届全国超临界流体技术学术及应用研讨会论文集 ——77D 超临界流体梯度结晶穿心莲内酯的研究 张文成+， 潘见， 谢慧明 农产品生物化工教育部重点实验室／合肥工业大学，安徽合肥230069 摘要：选择30％穿m莲内酯浸膏为原料，采用超临界c0：梯度结晶法，探讨了梯度结晶压力、温度对穿 。莲内酯梯度结晶的影响，并利用高效液相色谱进行纯度检测。结果表明，超临界cO：剃度结晶的穿_ 莲内酯在结晶板上呈梯度分布；梯度结晶压力与结晶穿。莲内酯的纯度呈正相关系；梯度结晶温度与结 晶穿。莲内酯的纯度是一条向上凸的变化曲线关系。 关键词：超临界CO：；梯度结晶；穿心莲内酯；高效液相色谱 fluid 超临界流体萃取(supercritical 术““。因天然产物中有机化学品成分复杂，分子量、空间结构与超临界溶剂(如C晚)相差较大，因而 单纯用SCFE技术分离时存在一定的局限性“1。本文作者在采用超临界流体技术分离纯化天然有机化学 品时，发现结晶性组分容易堵塞管道、滞留导致收率下降、与非结晶性组分共析等问题，严重影响了 SCFE技术的分离纯化效果。 而超临界流体梯度结晶技术…，是以SCF为萃取剂和展开剂，在一定压力和温度下，SCF与多组分 溶液接触，在萃取的同时进行结晶分离，由于萃取、层析、吸附、和重力沉降等作用使各溶质结晶析出， 并在结晶器上呈梯度分布。其特点是动态的SCF与静态的天然产物活性成分接触，形成的SCF溶液遇到 外界障碍物一结晶器的扰动、表面场效应等，使各组分在结晶器上结晶析出，并形成梯度分布；产生类 似于以SCF为展开剂的薄层层析，在结晶器的上部或下部可得到较高纯度的组分。 梯度结晶新技术进行精制纯化研究。本文主要探讨了梯度压力、梯度温度作用下穿心莲内酯在结晶板上 的梯度变化情况。 1材料与方法 1．1实验设备、仪器 +超临界COz梯度结晶装备(图1)，1．6L梯度结晶釜 图1实验装备流程简图 (GC气体钢瓶F过滤器C增压器 CC结晶釜SC分离釜) 基金项目：国家自然科学基金项目 Email：ZWClol20163．COlll 517 (高径比10：1)，电子天平(上海分析仪器厂)，Waters HPLC系统。 1．2材料 穿心莲浸膏(穿莲内酯含量为30％)由合肥拓峰生物工程有限责任公司生产，穿心莲内醋标准品购 于中国生物制品检定所，C02(99．8％食品级)。 1．3方法 实验分3步进行。第一步，原材料前处理，即先用合适的夹带剂在温水浴条件下溶解原材料，再沉 淀、过滤；第二步，用超临界COs梯度结晶浓缩的滤液；第三步，取样检测、分析。 1 4含量测定 ①标准曲线的制备 精密称取穿心莲内酯对照品1．82mg，置于5ml容量瓶中，用甲酵溶解并定容至刻度，摇匀，即 ml容量瓶中，定客至刻度，摇匀。进样针吸取稀释液， 得对照品贮备液。吸取该溶液1．0ml，转移至5 mmX150mm) C18柱(3．9 symmetryshield 依次进样2、6、10、14和18¨I；色谱条件“1：Waters5pm ml／min，检测波长205nlll，以色谱峰的面积为纵坐 色谱柱，甲醇一水(65％一35％)为流动相，流速1．00 标，进样量(Pg)为横坐标进行线性回归。穿心莲内酯在0．14—1．31Pg范围内与蜂面积呈线性关系， 回归方程为： 卢