大肠癌线粒体DNA转染NIH3T3与LST细胞的研究.pdfVIP

Modem ．102． 现代消化及介入诊疗2005年第10卷增刊 DigestionIntervention2005，V01．1 0，Suppi 【论文交流】 胞的研究 肖冰 宋卫兵 广州南方医科大学南方医院消化内科(510515) 大肠癌是一种涉及许多相关基凶的多因素多阶段的恶性肿瘤。实验表明染色体外存在抑癌因素，维持 细胞的肿瘤特性需要线粒体DNA(mitochondria 583 有文献报告，且意见不一．不尽相同。Savre—Train等在结肠癌细胞系Caco一2中检测到2 bp大片段的缺 D—loop区存在基冈组的多态性，而未发现有mtDNA的突变及mtGI(genetic 突变，2例错义突变，15 因的内存关系。人类的线粒体基冈组是环状、双链DNA，由于mtDNA全长也仅仅16Kb多，而且序列早已 完全清楚，只要通过没计适当的引物分别进行PCR和测序即可获得陔细胞mtDNA的序列，冈此为研究提 供了方便。mtDNA分编码区和非编码Ⅸ．即D一环区。D一环区包括重链的复制起点等重要序列，成为研究热 点。本课题组通过PCR及测序等技术分析r人大肠癌细胞株中细胞线粒体DNA变异，包括突变、缺失、 DNA不稳定性等．发现通过SW480，LoVo，HT29细胞株的mtDNAD一环区基因序列测序，检测出分别有 mtDNA片段在转染细胞核内的整合情况，并进一步观察转染细胞生物学行为的改变。旨在初步探讨mtDNA 突变在大肠癌发生中的作用。 实验方法 2．通过脂质体法(1ipofectamine (NIH3T3)及人大肠侧向发育性肿瘤细胞(LST)，利用G418抗性筛选转染细胞。 体DNA改变的特点，并进一步通过流式细胞仪观察转染细胞凋亡情况。 实验结果 1．成功构建了pcDNA3．1(+)一SW480 humanwhiteblood cell)mtDNA3个不同细胞株mtDNA蕈组表达载体。 4株阳性克隆转染细胞株．并进行了大鼍扩增。 3．4株NIH3T3转染细胞mtDNAD一环区分别检测到9，11，8，4个突变点．并相应有3，4，3，2个多态性 变化。从中可见pcDNA3．1(+)一SW480 mtDNA重组 表达载体转染后的NIH3T3细胞线粒体突变数较转染空pcDNA3．1(+)的明显增多。 现代消化及介入诊疗2005年第lO卷增刊Modem DigestionIntervention2005，V01．10，Suppl ．103． 4．转染前后．各组间细胞凋产无明显变化。 5．转染细胞的核基因组可扩增出目的基因及Neo基因。 实验结论 1．转染突变的大肠癌细胞mtDNA后转染细胞的mtDNA均可发生多处的突变位点。 2．通过转染后突变的外源性的mtDNA可以整合到核基因组内。 3．突变的mtDNA转染LST细胞及NIH3T3细胞后，不影响转染细胞的凋亡。 基因或抑癌基囚的表达异常。从而参与肿瘤的发生发展。 内镜下高频电及微波联合治疗消化道息肉 120例报告 李素娟 河南中医学院第一附属医院胃镜室(450000) 目前通过内镜下摘除消化道息肉的方法很多，我院内窥镜室采用高频电及微波联用治疗消化道息肉 120例(196枚)。胃肠道息肉患者以高频电及微波联用治疗效果明显优于其它单项治疗，且对大小不同形态 的息肉，能够彻底一次性治愈。 一、临床资料 1．病例选择 120例f J诊和部分住院病人，其中男性74例，女性46例；年龄6—80岁。其中上消化道包括食管息肉4 例，胃息肉68例，十二指肠息肉6例；下消化道以左半结肠及直肠多见，共42例；单发息肉76例，多发息肉