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全国乳酸行业研讨会论文集 耐氨米根霉发酵生产L一乳酸的研究 江苏省无锡市微生物研究所有限责任公司 匡群 孙梅 胡凌红 刘淮 施大林 陈秋红 陆茂林 JS—N02—02进行以氨水为 摘要：用筛选得到的一株米根霉Rhizopusoryzae 中和剂的L一乳酸摇瓶、15L自动发酵罐的发酵试验。以玉米粉双酶水解糖为 一乳酸纯度达95．3，糖酸转化率达71．6％。 关键词：米根霉氨水中和发酵L一乳酸 乳酸是一种重要的有机酸，具有调味、PH值调节、杀菌、防止杂茵生长 等功能，乳酸及其衍生物可广泛应用于食品、医药、农药、烟酒、印染、纺 织、皮革、印刷、化工、石油等行业。乳酸有两种同分异构体D一(一)一乳 酸和L一(+)一乳酸，其中L一乳酸在人体中自然存在，是WHO没有限定用 量的安全的食品品添加剂[1|。近年，以L一乳酸为活性前体的可降解材料聚乳 酸、绿色溶剂乳酸酯及新型绿色农药的开发成功【2，3J，使L一乳酸的发展前景 更为诱人，但降低L一乳酸的生产成本，生产高质量低价格的L一乳酸则是其 中的的关键。 在传统的米根霉L一乳酸发酵过程中，随着产酸的进行，发酵液PH不断 下降，当PH低于5时，菌体的生长和产酸会受到抑制，因此，常采用添加Ca． C03控制PH，使乳酸发酵能正常进行。但在糖浓度高于12％的L一乳酸高浓度 发酵时，发酵中后期醪中的乳酸钙浓度很高，乳酸钙极易结晶析出，发酵液粘 稠，形成稳定的高泡沫，影响供氧水平，降低产酸速度和形成杂酸。为了提高 溶氧水平，常提高搅拌速度或提高通气量，这样不仅增加能耗，而且容易出现 · ·61 全国乳酸行业研讨会论文集 跑料现象，增加染菌机会，降低发酵罐的装液系数。此外，在乳酸后提取中产 生的大量石膏废渣不仅在过滤时造成较大的乳酸损失，而且由于废渣不易处 理，对L一乳酸万吨级规模的生产将形成巨大的环保压力和废渣处理成本。为 此，为了降低L一乳酸生产成本，采用新型中和剂的发酵新工艺及其相应的提 取新技术如膜分离技术等的研究引起人们极大的关注。 本文报道了对一株耐氨产L一乳酸的米根霉JS—N02—02菌株的选育，以 氨水为发酵中和剂，对该菌株的发酵性能及适宜发酵条件进行了研究，并进行 了摇瓶和15L自动发酵罐的发酵比较试验，结果表明该新工艺具有良好的工业 化应用前景。 1材料和方法 1菌种 米根霉RhizopusoryzaeJS—N02—02，本研究所分纯选育和保藏。 1．2培养基 斜面培养基：PDA培养基 分离纯化培养基：察氏培养基，其中添加适量L一乳酸铵，制成L一乳酸 铵分离平板 麸皮培养基： 取未霉变结块或虫蛀的麸皮，按量加入40％左右的自来水、 拌匀，要求手捏成团，松手即散，然后装入茄子瓶或三角 瓶，1．5Kg／cm，灭菌30分钟，灭菌后拍打瓶，使麸皮松散。 3 种子培养基： 玉米粉双酶水解糖(不过滤)30一509／L，(NH4)2S04g／L O．5 O．02 KH2P04g／L CaC03 g／L 0．25 0．025％ MgS04。71-120g／L ZnS04‘7H20 pH6．0—6．2(消前) 自来水配制：1k∥cm2灭菌30分钟 发酵培养基： 根据实验需要选择C源