HBV全基因重组腺病毒感染免疫探究.pdfVIP

C 上述结果证明：1．C型编码前一x区的克隆数占总编码克隆数的66．7％，近年来的研究表明HBV 基因型是中国大陆地区主要流行基因型，因此推断前一x区编码现象在中国HBV感染者中较为普遍， 这同时提示前一X区的编码具有一定的基因型特异性；2．C型编码前一x区发生突变而终止前一x表达 突变的发生而导致了前一x区不编码蛋白。 m唧 田 唧 哪 眦 姒 髓 黜 雠 瞄 眦 田 仰 眦 M G L G Y w P 。 P A w N L c s 唧 唧 咖 姒 眦 眦 吼 柳 仰 枷 m哪 眦 瞄 瞄 s A D P Y c G T P 。 L F c s P 帆 唧 僦 枞 栅 咖 瞄 舭 姒 唧 研 研 哪 伽 Ⅲ v w s K T Y R N R ∞H僦s㈨Q L c c P L 僦G㈨Q仰。 E m㈨ 伽 m眦 。 H L L s 图2前一x区编码基因及蛋白质序列 总之，我们通过针对文献的再分析和分子生物学方法证实了前一前一S区和前一X区的实际存在， 并重新确定了s区启动子和x启动子的位置，提出全s基因和全x基因在HBV基因组中的新位置，可 能对HBV生活史、病毒受体、肝细胞的癌变等研究提出新的思路。 B6．HBV全基因重组腺病毒感染免疫研究 第一军医大学南方医院感染内科(510515) 刘志华何海棠侯金林骆抗先 HBV感染所致肝细胞损伤及随后的病毒清除是宿主细胞免疫应答介导的，因此研究HBV的致病性 与宿主的免疫反应是密切相关的。HBV是一种突变率较高的DNA病毒，变异后的HBV对其致病性和宿 主的免疫反应有何种影响。一直是各国学者非常感兴趣的课题，但由于缺乏合适的动物模型，该领域的 研究未能深入进行。 复制缺陷型腺病毒载体是一种比较成熟的病毒载体，因其能够感染多种类型细胞，外源基因转移和 表达效率高，腺病毒转载的外源基因以附加体的形式表达特点，目前已被广泛地应用于基因治疗、基因 疫苗和基因功能的研究中。本文借助复制缺陷型腺病毒载体将HBV基因组导入小鼠体内，观察HBV表 达产物诱导小鼠体液免疫和细胞免疫反应的情况。 资料和方法 一、材料 Hopkins大学惠赠。 骨架质粒pAaE“y一1，穿梭载体pAdTrack：由Johns DHl0B，由Johns DH5ct BJ5183及E．coli Hopkins大学惠赠；E．coli 2．菌株、毒种与包装细胞系E．coil 由本室保存；野生5型腺病毒(AdS)由中国疾病预防控制中心病毒所形态室姜秀丽博士提供；包装细 Culture 胞系腺病毒E1区转化的人胚肾293细胞引自美国典型培养物保藏中心(AmericanCollection。 Type 性内切酶购自美国NEB公司；转染293细胞用Lipofectamine(GIBCOBRL)试剂；鼠抗HBc单抗为中国 疾病预防控制中心病毒所肝炎室詹美云教授惠赠；辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鼠二抗购自北京 中山科技公司；ECL检测系统为Pierce公司产品；3H—TdR由中国原子能研究所提供。 4．动物：6—