人胸腺素原α的克隆、表达与活性研究.pdfVIP

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2017-08-16 发布于安徽
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人胸腺素原α的克隆、表达与活性研究.pdf

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19．人胸腺素原a的克隆、表达和活性研究’ 王栋，郭满盈，邱磊，吕岩，郭葆玉’ (第二军医大学药学院生化药学教研室，上海200433) 摘要：【目的】克隆人胸腺素原ctcDNA并在大肠杆菌系统内表达。【方法】利用RT—PCR技术从健康男性外周导天然表达胸腺素原n，部分纯化后用淋巴细胞玫瑰花结实验进行了初步的活性测定。【结果】凝胶电泳显示 PCR扩增产物的长度为300bp左右，重组质粒测序结果表明，插入片段与人胸腺素原n的序列完全一致巴细胞玫瑰花结形成率，表明具有一定活性。【结论1成功克隆人胸腺索原q基因并在火肠杆菌中得到表达。 f关键词】脾腺素原n；原核表达；大肠杆菌 L一7 07、／? cDNA and in ofhumanProTaEcoil cloningexpression WANG of Dong，GUO Lei，LUYah，GUO ofBiochemistry Man—Ying，QIU Ban·Yu+(DepartmentPharmacy,College Medical Pharmacy,SecondMilitary 200433，China) University,Shanghai cloneand human Methods：【ABSTRACT】Objective：Toprokaryoticallyexpress prothymosinu(ProTct)gene The ofhuman was RT_PCRand ProTu frommalePBMCtotaJRNA wasinsened encodingsequence amplified by imothe vectorPBV220．The of inducedheatThe ProTⅡwas prokaryoticalexpression expressionprotein by ofrhProTuwas E--rosetteformationtest．Results：ThePCR biologicalactivity assayedusing．T--cell product was in about300 size withthe sizeofProTq．The ofinsertwas bp consistentlyexpected sequence corresponded withthe ofhumanPron[Genbank PBV220， publishedencodingsequence ProTowastrailsformedintoEcoliDE3andanew witharelativemolecularofabout12．000was protein weight inducedheat．PfoT∞Ⅳas couldlncrease by purifiedpart