糖脂安干预糖尿病大鼠心肌细胞间质纤维化地研究.pdfVIP

糖脂安干预糖尿病大鼠心肌细胞间质 纤维化的研究 ●柯淑红彭聪孔彩霞郑承红+ 摘要 高糖高脂饲料喂养诱导2型糖尿病大鼠模型，实验大鼠分为4组：中药组(糖脂安组)／西药 论：TGF—B1表达增高导致细胞间质降解减少并生成增多，是心肌间质纤维化原因，而TZA 可以干预TGF—B1mRNA表达，预防心肌组织的纤维化。 关键词糖脂安／中药；2型糖尿病大鼠；心肌；转化生长因子p1 糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病性心脏病的一种特异性病变，以心肌细胞大量减少、细胞 肥大，晚期间质和血管周围纤维化为特征，表现为心肌顺应性降低和舒张期充盈受损为主的心 室功能异常¨]。研究表明心肌细胞间质纤维化可能是引起心肌舒张功能受损及DCM的一种重 要因素心]。TGF—B作为一个关键的生长因子，在转录、转录后及翻译水平增加胶原等间质蛋 白质的合成，同时抑制胶原的降解，在组织器官纤维化形成过程中起着重要的作用。本实验用 糖脂安干预治疗，旨在观察该方能否影响TGF—Bl的基因表达，干扰糖尿病心肌病变的进程。 基金项目： 作者简介： 作者单位：武汉市第一医院 材料与方法 一、动物造模及分组治疗 J，42只喂以高 1．造模：SPF级200—2209雌性Wistar大鼠52只。参照杨架林等的方法-3 糖高脂饲料并尾静脉注射STZ(SIGMA)制备糖尿病动物模型Ho。 2．主要药物：降糖通脉方由小檗碱(盐酸小檗碱，成都锦华药业有限责任公司， Ferme Taq酶：由Promega公司提供；琼脂糖：上海生工生物技术有限公司代理Spanish产品。 水2ml；正常对照组：10只，灌服生理盐水2ml。共三组，每日灌胃一次，疗程8周。治疗过 程中，除正常组给予普通饮食外，余继续喂以高糖高脂饲料。 二、TGF一131mRNA检测方法及统计学处理 心肌胶原分布，定量分析采用HPIAS一1000高清晰度彩色病理图文分析系统，每张切片在高倍 PRO 镜下(X400)随机选取10个视野并摄像保存，采用MAGEPLUS软件设置阳性表达的宏 程序，在同一条件下，分析心肌组织胶原相对含量，对阳性表达率进行组间比较。 录：逆转录反应体系见表1；③半定量PCR反应：PCR扩增的特异性引物序列见表2，各基因 PCR扩增反应体系见表3；④琼脂糖凝胶电泳；⑤对电泳结果用凝胶成像系统拍照，用Blan— mRNA表达量。 值来表TGF一131 表1逆转录反应体系 试剂名称 用量(／s1) 总RNA 4 (Oligo)dTl8 5 5×MMIJvBu￡fer 4 100mMDll 2 dNTP 1 RNA酶抑制剂0．5 MMLV逆转录酶0．5 去Rnase水 补至20 表2 PCR扩增引物序列 实验数据以；±s表示，用SPSS统计软件(12．0版)行单因素方差分析。 结 果 Ma。。on染色定量分析结果显示：与正常组比较，模型组左室心肌组织胶原含量明显升高 有统计学差异(P0．05)。 的表达。结果见表3。 各组大鼠心肌TG卜0lm尉NA的电泳图 100 300