榛子过氧化物酶同工酶的研究初报.pdfVIP

!!! 王墨竺圣垄垦!型 榛子过氧化物酶同工酶研究初报 杨青珍孙海燕季兰 (山西农业大学园艺学院，太谷030801) 摘要：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，检测了平榛、欧榛和平欧杂种榛的21个品种(系)幼叶的 过氧化物酶同工酶。结果表明：榛品种幼叶的过氧化物同工酶可分为快区、中区、慢区三大酶区， 其中，慢区(A)共检测出9条酶带：中区(B)共检测出8条酶带；快区(c)共检测出9条酶 带。根据各酶带的出现频率，提出了榛子品种幼叶过氧化物酶同工酶的基本酶谱。发现平欧杂种 榛品种(系)问存在较丈的遗传差异，并且大部分杂种棒出现了平榛和欧榛均不具有的酶带。采 用系统聚类法，初步绘出棒子品种间的亲缘关系图．根据聚类分析的结果，大多数平欧杂种榛与 欧榛亲缘关系近，与平榛关系远。 关键词：榛；过氧化物同工酶：种间杂交；聚类分析 L)，是世界四大干果(核桃、腰果、扁 榛子为桦术科(Betulaceae)榛属植物(Corylus 桃、榛子)之一。K期以来我国主要以平榛为主，其品质差产量低，无法满足市场需求，为 了获得优质、高产、抗性强的优良品种，辽宁省经济林研究所梁维坚等于1980年开展平榛 与欧洲榛子的种间杂交育种研究，1996～1999年陆续选育出平欧杂交优良品种(系)约90 个。为了探明平欧杂种榛与平榛、欧榛的遗传基础及它们之间的遗传差异，本研究测定了21 个榛品种(系)过氧化物酶的酶谱，初步查明榛品种叶片过氧化物酶同工酶的表现形式，以 期为榛品种资源的分类研究和利用提供依据。 1材料与方法 1 1样品的采集 作为试材的21个榛品种(系)均取自山西农业大学园艺站，取样时间为五月中旬，选 取新梢顶部起第3至第5片正常叶片，置于冰壶中迅速带回实验室。 1 2酶液的提取 样品先用自来水冲洗，再用无离子水反复冲洗，用滤纸揩干后称O．1克剪碎，加入提取 基乙醇)，冰浴研磨。以12000r·min。1于4℃离心20min。上清液即为原酶液。 1．3电泳分离和染色 本试验采用垂直扳式聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分离胶浓度为7．5％，浓缩胶浓度为4％， u 每样品的进样量为20L，以溴酚蓝作为前沿指示，电泳时间为7h左右。整个电泳过程均在 冰浴中进行。电泳后的胶板用联苯胺染色法染色。显色后当天内测定酶带的相对迁移率(Rf)， Rf--酶带迁移距离／溴酚蓝迁移距离。然后绘图，并制成千板，长期保存。 本研究受山西省留学生基金(2001036)与山西省自然科学基金资助。 榛子过氧化物酶同工酶研究初报 1 4聚类分析 利用SAS软件的系统聚类平均法，对21个品种进行聚类，获得聚类谱系图。 2结果与分析 2．1基本酶谱 从表1可知，平榛、欧榛和平欧杂种榛的过氧化物同]．酶谱带大致可分为慢区(A区)、 榛品种(系)中，酶A区的第2、4、7、9号酶带和酶B区的第3号酶带，其出现频率均在 70％以上，有可能是榛属的主要酶带。B区的第6号带和第8号带为所测21个品种(系)所 共有，可认为它们是榛属植物的过氧化物酶基本谱带。 表I榛品种(系)过氧化物酶同工酶各酶带表型频率 n 。蚴∞ ：譬|蓍量 m踮 。姚Ⅲ O乱 。眦础 n蛇 。啪研 0口； 。啪薹； 乱坞 ，哪㈣ o㈨m辐0 眦盯贼 私 H 2 2特征谱带 种(系)都具有这条带，可认为是鉴定平榛的特征谱带。A区的第6号带(Rf=0．278)、笆9 些特征谱带可能与品种(系)的某些形态特征和生理特性有关，可用于该品种(系)的鉴定。 同时，也可能为进一步杂交育种中的杂交亲本选择与选配提供参考。 干果研究进展(3) 1 7=-==1… 一=： 一： 盟!。一j *． -：