“复方861”抑制胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型MMP2mRNA表达地研究.pdfVIP

Z5：2—5 8．ono“P，MorLnnS．FraEKhlttoA．et experi“Mntalcirrhos诂：a乩fuccumnd…ph。㈣rlc自1study。n aI．№patkm【cr。一cul盯katures{n cCL4一trtatedrats 55—563． J HepatoI，2000-33：5 for 9 Bata¨erR．Ni∞lasJM，Gin朽P，Ha【~ContractIonofhumansteUateceUactivated【nclucure：aT。【evo】t89eopeTatedcaIc… ch蛐帆Is，JH印atd，199B，291398—408． currenci…t c f。s 10C神alie CA，et“．cotlst【cutiveupr。guIat【0nofcalci…h丑曲el ph∞chromocyt…cdl：：。【e。f A，Berning肛B．Haas ^【Id r—jun．JPhysiol，1994，15}ll一27． 复方86l抑制胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型 MMP2mRNA表达的研究 阴赫宏 马红马雪梅刘天会 贾继东 王宝恩 首都医科大学附属北京友谊医院肝病研究中一口 wistar大鼠进行胆管内逆行性注入硬化剂加胆管结扎导致胆管阻塞，制备胆管阻塞性肝纤维化模型。于术 MMPzmRNA明显增高，复方86l能够抑制增高，可能是其抗肝纤维化作用的机理之～。 复方861是临床治疗肝纤维化以及早期肝硬化的有效药物，实验研究表明，该药物既可抑制细胞外基质 的台成，又可提高胶原酶活性o][2]，因而抑制肝纤维化的发生和发展。本实验应用逆转录定量PcR方法，观 组甥MMP2mRNA表达的影响，进一步阐明复方86l抗肝纤维化的作用机理。 材料与方法 2．胆管堵塞性肝纤维化大鼠模型的制备参考文献方法…进行。雌性wistar大鼠麻醉后行腹正中切口， 胆总管，不予硬化剂注射及胆管结扎。95只大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(25只)、复方86139／kg、 治疗组分别给予不同剂量的药物。于治疗后49天处死大鼠，取肝组织立即冻存于液氨中备用。 3．血清生化学检测应用A一1000全自动生化分析仪测定。 4．血清纤维化检测HA、LN均按说明书以放免分析法检测。 5．以RT—PCR方法观察胆管堵塞性大鼠纤维化肝组织MMP2mRNA表达水平 度法测定提取的总RNA含量及纯度，oDⅢ／OD蛳在1．8～2．0之问。 5．2 ·】45- MMV。 C TTG 引物序列如下：MMP2：上游：5’一TTTTGCCCAAAGAAA 2626bp)，下游：5一ATGTCAGACAACCCGAGT 0【llbp)眦。 GAPDH：上游：5。一GAGGACCAGGTTGTCTCC GGATGGAATTGTGAGGGA GA一3’(position：1155～1134bp)[“。 达水平。 6．统计学处理：结果以x。士s表示，应用单因素方差分析进行统计学处理。 实验结果 1．一般情况 根据动物的体征，包括眼睛、耳朵、皮毛、尿液颜色，判断黄疽情况，赊正常对照组外，胆管堵塞动物于手 术堵塞后1周，开始出现黄疸，黄疽发生率为95％。 2．血清生化学指标的变化