猪传染性胃肠炎病毒N蛋白基因原核表达载体构建.pdfVIP

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2017-08-16 发布于安徽
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猪传染性胃肠炎病毒N蛋白基因原核表达载体构建.pdf

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猪传染性胃肠炎病毒N蛋白基因原核表达载体的构建翁崇鹏1 张莉2 毛娅卿1 何后军1 张培君2 1江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌330045 2北京市农科院畜牧兽医研究所，北京100089 进行亚克隆重组到PMDl8-T质粒载体上，连接，转化，鉴定后得到阳性重组质粒，命名为prN，将重组质粒插入株均具有较高的同源性，达95％以上。推导的氨基酸序列同源性为95％以上。并将目的基因与原核表达载要依据。关建词猪传染性胃肠炎病毒；N基因；分子克隆；载体构建 a咖andse岬嘲曲蟾0fN畔岫n砸圈删eG蚋蚋瑚I蛔临v鲰鼬峨岬l枷Strain WENG 0fAIli训ScienceandVeter- ir“ryMedicine，正蚰驴aAgriculturaluI】iv∞畸，Nxachang330045，china；2．Institute and FomsaySciences，B删i工lg，100呻，ehm) Medicine，B喇ingAcademydAglculttaHl Al矧aactThe mRNA0f fore was Hebei viral锄姊：吼科m porcineUansmissible留曲=D即∞盱i日由vims(mEV)isolated withRT-PER．A eontaim ORFofN the wl-aeh sizedtheDNA amplified DNA如酱1目1was叫t6ed e∞apletely gene，and isabout PER andthen into PMDl8-T cloned vect盯，the fragment 1149bp．ThepIodudb“pmjfied plasmid dorfng reeona血mt FIN endormeleoase am]- plasmidsw∞tl张ignatedand珊词y蒯by di删on钿’Pl叩inserts，qhe唧即ce ofIhe therecoalblnamindicatedthatTGEVisolated妇Hebeisharedmorethan95％withPut- ysis insert抽删in pTN 8恤1illand％-1933strain．Theamino due一115州n，FS772／70strain，T014 w鹪above95％．‰ acid∞qIle噼homology N andmol衄LdsrofN geneW88subelonedintopGD(邪3，∞prokanyoficexpr∞singvector，Clonin8 genefiomTGEV，it 8basisofthesUldl∞from andmohcuhreharaeter埘candthe provides