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1绪论 生物产品要求高质量：纯度、卫生、生物活性 方法选择的基本原则 1)、尽可能简单、低耗、高效、快速2)、分离步骤尽可能少。3)、避免相同原理的分离技术多次重复出现4)、尽量减少新化合物进入待分离的溶液。A)、引起新的化学污染；B)蛋白质的变性失活 5)合理的分离步骤次序。 原则是：先低选择性，后高选择性；先高通量，后低通量；先粗分，后精分；先低成本，后高成本。 设计前应了解的信息 1）、在设计前，首先要掌握的产物物化性质，主要包括：(1)、溶解度及影响因素，包括温度、pH值、有机溶剂和盐等；(2)、分子量和分子形状。对于高分子物质非常有意义；(3)、沸点和蒸汽压。对于热稳定的小分子物质非常有意义；(4)、极性大小；(5)、分子电荷及影响因素，包括pH值和盐等；(6)、功能团。功能团为萃取剂和特异性吸附的选择提供依据；(7)、免疫原性。设计亲和色谱；(8)、稳定性及其影响因素，包括温度、pH值、毒性试剂等(如青霉素低pH不稳定)；(9)、分子的淌度及影响因素，包括pH值、离子强度和盐等； (10)、等电点pI； 2）、成品规格（或产品质量标准） 3）、进料的组成和物性 (1)、目的产物的浓度。(2)、物料中的与目的产物相近物质组成的物理化学性质。 (3)、目的产物的定位。 (4)、菌种的种类和形态。 (5)、微生物的含量和发酵液的黏度。 4）、生产规模 5）、危害性 5）、危害性 (1)、离心产生的气溶胶、发酵产生的废气、干燥产生的粉尘等。 (2)、目的产物本身的危害性；抗肿瘤代谢类药物，类固醇类抗生素，激素类药物等。 (3)、试剂危害。萃取试剂CCl4、甲苯、苯、二甲苯、CNBr。 (4)、微生物的危害。重组DNA工程菌不能任意排放。这一菌种为新的物种，不能排除对生态系统和人的危害。 6）、分批分离还是连续纯化 对环境的考虑 1）、废水 ??A、除菌过滤和灭菌处理； B、符合BOD的要求； 2）、废料 ??A、灭菌处理；B、综合利用：动物饲料、饲料添加剂，有机肥料 3）、废气 ??A、除菌过滤和灭菌处理；B、废气（有机溶剂）回收 4）、溶剂的回收 ??A、减少环境排放，减少污染； B、循环利用，减低成本 1.4 生物分离技术和原理 物质分离的本质是识别混合物中不同溶质间物理、化学和生物性质的差别，利用能识别这些差别的分离介质和扩大这些差别的分离设备实行溶质间的分离或目标组分的纯化。 性质不同的溶质在分离操作中具有不同的传质速率和（或）平衡状态，从而实行分离。 平衡分离 定义：根据溶质在两相间分配平衡的差异实现分离。 溶质达到分配平衡的推动力仅取决于系统的热力学性质。 溶质达到相间平衡的过程为扩散传质过程，平衡分离又称扩散分离。 蒸馏、蒸发、吸收、萃取、结晶（沉淀）、泡沫分离、吸附和离子交换等是典型的平衡分离过程。 差速分离 定义：利用外力驱动溶质迁移产生的速度差进行分离的方法。 传统的机械分离方法：过滤、重力沉降、离心沉降 典型的差速分离法：超滤、反渗析、电渗析、电泳和磁泳 非蛋白类杂质的去除 （1） DNA A 阴离子交换（pH 4.0) B 亲和层析（不被吸附） C 疏水层析（2）热原 （蛋白质溶液中的去热原） A ?生产过程无菌 ?B ?所有层析介质无菌 C 所用溶液无菌 ?D 亲和层析（多粘菌素）（3）去病毒 A ?加热 （60 C) B ?过滤 ???C ?灭活剂 2细胞分离与破碎 预处理的目的: 改变发酵液的物理性质 ?(黏度、颗粒大小、颗粒稳定性等)，固液分离速度，分离器分离效率； 目标产物转移其中一相(多数为液相)； 1、 加热 最简单、最经济的预处理方法是加热，加热不仅可以增加料液的操作特性，也可以对其进行灭菌。但加热变性的方法只适合于对热稳定性的产物。 加热可产生： ˉ黏度、促凝聚、ˉ固体成分体积、破坏凝胶结构、增加空隙率、去蛋白 2、调pH值：方法简单有效、成本低廉 pH直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质，适当调节pH可改善其过滤特性。 对于氨基酸、蛋白质等两性物质作为杂质存在于液体中时，常采用调pH至等电点使两性物质沉淀。 ????? 另外，在膜分离中，发酵液中的大分子物质易与膜发生吸附，常通过调整pH，改变易吸附分子的电荷性质，以减少吸附造成的堵塞和污染。 此外，细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个pH下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒，有利于固液分离。 3、凝聚和絮凝 通过电解质的加入促进原始溶液的凝聚和絮凝 主要作用为增大混合液中悬浮粒子的体积，提高固液分离速度，同时可除去一些杂质。 凝聚和絮凝是两种方法，两个概念。 凝聚：指在投加的化学物质（铝、铁的盐类或石灰等）作用下，胶体脱稳并使粒子相互聚集成１mm 大小块状凝聚体的过程。 絮凝：指使用絮凝剂（天然的和合成的大分子量聚电解质）将