乌拉尔甘草与胀果甘草的特异PCR鉴别研究.pdfVIP

遭了红花子的染色体特征，以供鉴别。 (1)材料与方法 红花子购于安国药市，对照品采于安国药材栽培场。经鉴定为菊抖红花 Carthamus tinctorius L．的干燥成熟瘦果． 将种子在25_c恒温箱内培养萌发，当根失长到约0．5 cm时，切取根尖．室温下经o．002mot／L的 8一羟基喹啉与0．05 mol／L的秋水仙碱混台渡顶处理约4h，水洗后，用卡诺固定液(无水己醇一冰醋酸 {3，1)固定12～24 h，经双燕水冲洗2次，用1mo!／L的盐酸在60c恒温下解高20min，在卡宝液 (改良前石炭酸品红液)中压片，染色，镜检(图略)，骏分散良好的标本．冰冻，中性树脂封片。显微 照相，计数测量。 (2)结果与讨论红花子根尖细胞染色体2n=24，染色体组总长度为33．50脚．变异范围为 0，21～o．42“m，最长染色体为最短染色体的1．67倍。染色体数量和形态可作为生物种的一十物种特 征，植物组织染色体标本片制备易于普及，也更能反映物种特征．可作为红花干显微鉴定的特征之一。 乌拉尔甘草和胀果甘草的特异 PCR鉴别研究 刘春生阎玉凝自根本王文垒 (北京中医踌大学中药学院北京100029) 擅要乌拉尔甘草和胀果甘草均为中药甘草的重要基谭，其药材利用传统方法不暑鉴射，但是为保证中药材质量 稳定，将甘草药材准确鉴别劐种根有意义。本文根据乌拉尔甘草和张果甘草ITS序列燕异，设计了两对特异引物，对 乌拉尔甘草和胀果甘草的药材进行鉴捌，取得了满意的结果。 关t词乌拉尔甘草-雕果甘草；特异PCR鉴别 uralensis 甘草为我国常用大宗中药材，《中华人民共和国药典》收载其基源为甘草Glycyrrhlza L．的根和根茎。虽然以上3种甘草属植物均可 Fisch．，胀果甘草G．iaIlat口ht．和光果甘草G．g￡abra 做正品甘草入药，但是质量有一定差异，为保证甘草药材质量的稳定，有必要将甘草药材准确鉴定到种， 由于以上3种甘草属植物的根和根茎性状，显徽及理化特征区别很小．井且受邛境嗣素影响较大，利用 传统鉴定方法将甘草药材鉴别到种有很大困难． V 近年来，核DNA内转录问隔区(ITS)在植物系统学方面的研究方兴未艾，大量研究结果说明，ITS 区是一个可用于近缘种问鉴别的DNA分子标记，尤其是在任何药用部分都存在，利用ITS序列作为近 绿种间药材的鉴剐具有广阔的前景． 为解决甘草药材的定种|可题．我们根据乌拉尔甘草和胀果甘草核DNA内转录衄撕区(ITS)序列 差异，设计了两对PCR引物，探索用PCR方法对乌拉尔甘草和胀果甘草进行静鼻、准■的鉴别． 1材料与方法 1．1材料与仪器 甘草药材采自内蒙古杭锦旗和甘肃金塔，由阎玉凝、王文全教授提供并鉴定-分别为乌拉尔甘草 Bat-的根． Fisch．和胀果甘草G．inflata Glycyrrhiza“ralensis PCR试剂除BSA为华美公司生产外其他均为上海生工生物工程有限公司出产．PCR扩增仪 CO．LTD．TC-9B／T,q-I(a)]· THERMO—MAGNETICS DAHE [HANGZHOU ·107- 1．2方法 (】)引物的筛选乌拉尔甘草的ITS序列在187、4J1、412、413