利用生物传感器检测有机磷农药地研究.pdfVIP

D_07 利用生物传感器检测有机磷农药的研究 康天放 刘东燕 徐军来 (北京工业大学环境与能源工程学院，北京100022) 随着现代农业的发展，农药的使用13益广泛．为了保证农业的高产，旌用农药是防治病、虫、 草害的一项重要措施．我国目前生产和使用的农药主要是有机磷和氨基甲酸酯类农药，这些农药大 部分属于剧毒品，它们虽然药效高、在环境中降解速度快，但是它们在蔬菜等农产品中的残留严重 危胁着城乡居民的健康．为了能够实施对农产品中农药残留快速、低成本的现场检测，已有利用速 测卡【I】、生物传感器嘲、酶联免疫吸附剂法[31等方法检测农药残留的文献报道。有机磷类和氨基甲 酸酯类农药是乙酰胆碱酯酶(ACHE)的抑制剂，本文以pH玻璃电极为基础电极，将固定有AChE 的尼龙网覆盖在pH玻璃电极的敏感膜表面，翻成有机磷农药的生物传感器，并且将该生物传感器 应用于实际样品中农药残留的测定，结果满意． 璃电极为指示电极，以饱和甘汞电极(SCE)为参比电极．所有的试剂均为分析纯，所有的溶液都 用去离子水配制． 5x10。moiL的磷酸盐缓冲溶液(pH7．4) 将10mgAChE和lOmg牛血清白蛋白溶解于100uL 中，加入20uL浓度为5％的戊二醛，充分混匀，移取6川L该混合溶液涂到尼龙网上，在室温下风 干、交联，用橡皮。形圈固定于pH玻璃电极敏感膜表面，制成AChE膜生物传感器。该传感器不 用时放入冰箱中，在40c温度下保存． mo／／L NaCI的0．001 移取20mL含0．1 mol／L磷酸盐缓冲溶液(pH8．O)于电解池中，插入传感 器和参比电极，加入乙酰胆碱，使其浓度达到0．002molA,，测量出生物传感器的电位作为它的最初 响应值，加入适量含农药的溶液，温育10rain后测量最终的电位响应，则生物传感器的相对响应值 、 为： ，《纠圳。％ 其中昂和局分别是生物传感器在温育之前于空白溶液中的最初响应值和在含农药的溶液中温育 之后的电位响应值。在AChE的催化作用下，乙酰胆碱水解为胆碱和乙酸： 乙酰胆碱+H20————◆胆碱+乙酸 乙酸的产生使pH玻璃电极敏感膜附近的溶液pH值减小并且达到稳定值，此时pH玻璃电极的电位 值为磊，但是当加入有机磷类或氨基甲酸醋类农药时，AChE的这种催化作用会受到抑制，随着农 药浓度的增加，上述反应进行的程度就会逐渐减弱，直至完全被抑制，因此在加入农药前后pH值 改变的幅度相应增大，即磊与E，的差值增大，使生物传感器的相对响应值的绝对值相应增大，在一 定的农药残留浓度范围内，相对响应值与农药残留浓度的对数值之间成正比关系．制备传感器时固 定于尼龙网上的AChE用量会影响传感器对有机磷农药的响应性能。本文通过比较用不同量AChE 制成的生物传感器的响应性能，最终选用0．5 mg的AChE作为制备每一支传感器的最佳用量． -169． 有机磷农药对AChE的抑制与两电极浸入待测溶液中的时间有密切关系，本文使用敌敌畏标准 溶液对酶电极的响应时间进行了测试，响应时间是指：从pH电极和参比电极浸入样 品溶液中算起，到电位值达到稳定状态，即在1min之内电位变化的幅度小于lmV为止。将AChE 8．O) 膜pH玻璃电极和参比电极浸泡在20mL含0．1moYLNaCl的0．00Jmol／L磷酸盐缓冲溶液(pH 中，5min后加入一定量的乙酰胆碱，使其浓度达到0．002moI／L，然后加入敌敌畏标准溶液，使其 浓度达到0．315 rain后，AChE膜覆 me／t,，在不同时间记录其电位读数，结果发现，当农药加入10 盖的pH玻璃电极的电位达到稳定值，因此本文选用10min作为最佳的温育时间。