微囊藻毒素检测技术及其在水环境监测中的应用.pdfVIP

微囊藻毒素检测技术及其在水环境 监测中的应用 杨浩文，赵孟绪 (广东省水文局，广东广州510150) 摘要：综述了目前应用较多的几种微囊藻毒素检测技术(生物毒理检测技术、化学检测 技术、ELISA检测技术)．分析了各种检测技术的优点和局限性，对水环境监测工作中应 用微囊藻毒素检测技术提出了初步建议。 关键词：微囊藻毒素；水环境监测；综述 目前，全球约有60％的淡水水体达到富营养化水平，蓝藻水华作为水体富营养化的重要表征， 已成为全球性的水环境灾害…。淡水水体中常见的水华蓝藻主要有微囊藻属(Microcystis)、鱼腥 华监测样品中的62％出现有毒种类HJ。产毒水华种类主要有微囊藻、鱼腥藻、柬丝藻、节球藻、拟 柱胞藻和颤藻等种属”j。 微囊藻水华在全球淡水水体中发生频率最高、范围最广、持续时间长且危害最大。在我国，微 囊藻也是淡水水体中最常见的水华种类∞。7J。微囊藻毒素则是分布最广、毒性最大的藻毒素种类 之一，目前为止，已发现60多种微囊藻毒素，该毒素因可能具有促肿瘤作用而备受关注。微囊藻 在300。C时仍可长时间保持稳定，且普通蛋白水解酶对其不起作用剖。传统的饮用水处理技术很 难去除水体中蓝藻毒素。1878年Francis首次报道了动物由于饮用含蓝藻的水而死亡的事件以 来，世界各地因蓝藻毒素引起鸟类、鱼类、动物甚至人类死亡的事件频繁发生。我国江苏海门市、 启东市及广西扶绥县的原发肝癌发病率较高被认为与当地居民长期饮用含微囊藻毒素的水有 关一J。世界卫生组织(WHO)对饮用水中的微囊藻毒素MC—LR提出建议标准为1斗g／L。 国外在蓝藻毒素研究方面起步较早，相关研究较多，而我国在微囊藻毒素的研究和监测方面 cystin)，称其为快速致死因子。我国对有毒蓝藻水华的研究开始较晚，1984年俞家禄等对武汉东 湖的蓝藻水华的毒素进行检测，是我国开展较早的产毒蓝藻的研究。近几年来，随着国内淡水水 体中微囊藻水华的频繁发生，国内有关微囊藻毒素研究的文献数量明显增加，供水、卫生、环保、环 境监测、水利和水文等行业相继启动了微囊藻毒素检测和监测工作。我国2006年颁布执行的《生 活饮用水卫生标准》和GB3838—2002《地表水环境质量标准》均将微囊藻毒素列为检测项目，规 定MC—LR当量l斗g／L。对于供水、卫生、环保、环境监测、水利和水文等行业而言，需要适用于 常规监测的简单、快速、准确且具有可比性的统一检测方法。目前，国内有关微囊藻毒素检测方法 的研究较多，但仍未建立统一的方法。本文综述了国内外在微囊藻毒素检测技术方面的进展，对 这些技术进行比较后，提出了水环境检测工作中的应用微囊藻毒素检测技术的建议。 作者简介：杨浩文(1968一)，女，广东梅州人，硕士，高级工程师，主要从事水环境监测和管理工作。 ·43· 1 生物毒理检测技术 生物毒理检测法是利用急性毒性试验对微囊藻毒素进行定性、半致死剂量及定量的检测方 法。该检测方法所用生物实验材料有小鼠、肝细胞、某些无脊椎动物(卤虫幼体、蚊子幼体、成熟蚊 子)¨…、动物胚胎‘1¨和细菌¨刮等。 最常用的是小白鼠毒性试验方法，多用小鼠口饲和腹腔注射等，而腹腔注射毒性远大于经口 途径。腹腔注射法是最早采用的检测微囊藻是否有毒或鉴别肝毒素和神经毒素的常规方法。小 鼠在被腹腔注射有毒提取物后，在1—3h后会因肝脏内出血而死于血量减少性休克，尸检过程肝 脏呈严重充血现象H31。基本程序分为毒素的收集提取和对小鼠进行腹腔注射2个步骤。自然水 体微囊藻水华毒素的收集主要包括拖网(25号浮游植物网)、筛绢浓缩和离心3个步骤；实验室培 养的微囊藻则可直接进行离心收集。2|。根据注射后小鼠的存活时间及半致死剂量(LD，。)来对毒 素进行评价。LD，。的单位为mg(蓝藻干重)／kg(小鼠体重)，毒性等级可大致分为无毒(LD卯 小白鼠毒性试验方法具有操作简单、结果直观、可粗略地判断是否有毒性及检测新毒素等优 点；其局限为灵敏度较低、检测结果与小鼠的品系有关、可比性较差、需要较高的毒素浓度、灵敏度 和专一性不高、无法准确定量、不能辨别毒素的异构体类型、小鼠的维持费用高和工作量大 3【l 等i145|。除小鼠外，虾、蝗虫、大型溢等也被作为生物鉴定方法的测试基体。生