一株蒽降解菌的分离鉴定及其降解特性研究.pdfVIP

一株慧降解菌的分离鉴定及其降解特性研究唐玉斌。等 一株蒽降解菌的分离鉴定及其降解特性研究 唐玉斌”，毛莉2， 吕锡武1， 陈芳艳2， 梁林林z (1．东南大学环境工程系，南京2l0096；2．江苏科技大学生物与环境工程学院，镇江 擒要：从石油污染土壤中筛选出一株葸的高效降解菌株JlIsT-l，JUsT_l可在以蒽为唯一碳源的培养基中生长，能利用蒽的最高 系。JUsr．1的菌丝呈白色或粉红色，并存在三类孢子。分别为小型分生孢子(，，li朋∞鲫i出口)、大型分生孢子(雕蝌w硼‘画泌)和厚垣孢子 (曲蛔唧面雄捌嚣)，但大孢子分隔数较少，隔膜卜2个。JIJ辨l菌株为好氧菌。投菌量、初始蒽浓度、pH和H202浓度是影响葱降解效率的 因素。H 达70％以上。 关键词：蒽降解菌；分离筛选；ns序列；水体生物修复 中图分类号：x172文献标识码：A 文章缩号：1∞3-6∞4(2∞7)O蛐0ll—03 2％琼脂。 多环芳烃(PAHs)是一类在环境中广泛分布的污 染物，它具有潜在的致癌、致畸、致突变特性Ⅱl。它是一 富集培养基：NaCl 59；蛋白胨109；牛肉膏59； 类憎水性物质，脂溶性较强，易于吸附在水体沉积物中， 水，lL。 ， 在沉积物中的浓度比在水体中的浓度高出几个甚至几 缓冲溶液的配制参考文献【5】。 十个数量级瞄。微生物降解是水体沉积物环境中R蝴s 1．2试验方法 降解的主要途径圈。要对多环芳烃污染水体进行生物修 1．2．1菌种的筛选分离 复，就必须首先获得可高效降解多环芳烃的优势菌株。 将采集的土样加人蒸馏水后空曝24h，静置后取 本研究从自然环境中筛选出一株葸的高效降解菌株， 对其进行菌种鉴定并考察其降解性能，旨在为多环芳 中，在振荡速度12叫蛐n、恒温30℃的水浴摇床中驯化 烃污染水体的生物强化修复提供基础数据和参考。 5d后，取10mL培养液移接至新鲜培养基中，如此反复 7个周期后，倒平板进行划线分离，5个周期后分离纯 1试验材料与方法 化出单一菌株。 1．1试验材料 1．2．2菌种的鉴定 驯化用菌源来自江苏油田某油井附近石油污染土 从形态学和分子生物学两方面对菌种进行鉴 壤，该土壤呈黑褐色。试验采用三种培养基：选择性液 定。采用德国蔡司光学显微镜观察菌体形态及大 体培养基、选择性固体培养基和富集培养基，用作降解 小。在此基础上对菌株进行生理生化鉴定：提取 菌的驯化筛选、培养、纯化分离和保存。 菌株的核糖体rDNA【们，以菌株总DNA为模板， 选择性液体培养基由无机盐和蒽组成，无机盐成 使用050—80lT(衲dient96型PCR扩增仪，并以 分如下圈：l(1妒0419；＆脚)ID‘·3啦O1．39；MgS04 0．29； ml抖03 o．059；znS04·7H∞5mg； 19；CaCl20．029；眦13 MnS04。}120l 1Ing；CuS04·5H20 5mg；Na舭004·2H20 o．5Ing；H20 lL。将pH值调到7．o