应用色质联机对淫羊藿多糖结构地研究.pdfVIP

第20卷增刊 分析测试学报 V01．20 FENXICESHI ofInstrumental 2001年7月 XUEBAO(Journal Jul．2001 Analysis) 应用色质联机对淫羊藿多糖结构的研究 张宏，白 梅，常新 (东北师范大学化学学院分析测试中心，吉林长春130024) 淫羊藿多糖(Epimedium 多糖还有刺激骨髓DNA合成的作用。近年来对淫羊藿甙及淫羊藿总黄酮的研究较多，而对淫羊藿多糖的研 究较少。用化学实验方法研究淫羊藿多糖的结构，存在时间长、实验步骤多等问题。寻找快速、准确的测 试手段，对研究淫羊藿多糖的结构有着重要的意义。本文从淫羊藿茎叶中提取水溶性多糖，经甲基化后，再 经色质联机(GC—MS)分析，初步确定了糖苷的键型，并用化学实验方法进行了验证。 1 实验部分 1．1实验材料和仪器 淫羊霍(炮制过)购于药店，其余所用试剂均为分析纯。美国惠普HP5973MSD。 1．2 EPSⅡ提取及EPSⅡ甲基化 NaOH的DM- CL一4B制备柱层析得到3个样品EPSI、EPSⅡ和EPSⅢ。EPSⅡ为棕褐色粉末。将2401119 So混悬液加入到20nagEPSⅡ的DMSO溶液中，搅拌下加入36 萃取、干燥、IR谱检测完全甲基化后，再经水解、还原和乙酰化得到甲基化的糖醇乙酸酯。 1．3色质联机(GC—MS)测试条件 rn,5(30IllX 0．32衄×0．3,ttm)，进样口270oC，离子源200℃，程序升温：初始温度60℃，保持1min， min。 以4。C／rain升至150℃，以8C／rain升至265℃，保持15 2结果与讨论 将多糖中各种单糖残基中的游离羟基全部甲基化，进而将多糖中的糖苷键水解，其羟基所在的位置，即 为原来单糖残基的连接点。根据不同甲基化单糖的比例，可以推测出此种连接键型在多糖重复结构中所占 的比例。用此法得到的羟基及NaBH。还原醛基后产生的羟基，经乙酰化可得到甲基化的糖醇乙酸酯，GC— MS联机分析，通过气相色谱的出峰顺序和对质谱谱图的主要离子碎片的分析便可以较准确地确定糖的连接 键型。 2．1色质联机(GC—MS)分析 EPS II经甲基化后，色质联机(GO—MS)分析结果见图1、表1和表2。 表1主要离子碎片峰 表2甲基化单糖摩尔比及糖苷键型 分析测试学报 第20卷增刊(2001) 于支链上。 4．2 宝3．4 g2．6 j1．8 1．0 30 3l fH／rain 图l EPSⅡ经甲基化后色质联机(GC—MS)分析结果 2．2 EPSⅡ的结构 高碘酸氧化、Smith降解等多种化学实验手段的分析结果相符合。 严P ●k G崔 ]‰广鼙广3‰l一章一苹一浏1一 Ah M矗Xy。! 池 of GC——MS theStructure