野罂粟愈伤组织培养与其次生代谢产物生物碱的研究.pdfVIP

3讨论 清除Oi的方法在固定条件下，经多次涮试操作易于掌握，灵敏度高，只要严格控制条件(如光照时间、 温度等)重现性即很好，而且不需要贵重仪器和设备。该方法可以用于测定各种物质清除of的作用。 由实验结果表明，双酮益心胶囊确有SOD样的作用。在清除0f方面显示出租好的作用，这是否对心 脑血管系统疾病的治疗起到一定作用的原因还有待进一步研究。对af沉积而引起舶炎症、色素沉着型色 斑等症状，经常使用定能达到延年益寿之功效。经药理实验结果表明，阳性对照组与样品之间无显著性差 异，P≥O．05。而与阴性对照组相比均有显著性差异。(参考文献略) 野霉粟愈伤组织培养及其次生代谢产物生物碱的研究 5-蓉4t程缸重马舅1张辉 (沈阳药科大学生特技术研究室 沈M 110015；1‘京生物医药研东所北京100091) nudiesule 野霉粟(Papaver L)系多年生草本植物，属罂粟科署粟属植物，生于山坡或沟边草地，分布于宁 夏、内囊古、东北、山西等地，其果壳人药，主治肺虚久咳、久泻久痢、头痛、胃痛、月经痛等。野暮粟中生物碱 为其镇痛、止咳、定喘的有效成分。由于该植物资源非常有限，且生物碱含量较低，合成难度较大，故作者应 用现代生物技术方法进行了野罂粟愈伤组织／细胞培养和野罂组筝{培养物生产次生代产物(生物碱)的初步 研究。 1实验材料 实验仪器(略)。 材料来源：野罂粟愈伤组织由野罨粟种子萌发的无菌籽苗诱导而来。野署粟碱 5．72±0．02，用O．S％琼脂固化培养基。 2愈伍粗颤t代墙彝 养基的lOOnd三角瓶中。置于恒温培养箱中(25±1)℃，暗培养，每隔30d继代一次。 盘伤组织生长参数的测定 以愈伤组织摄重(FW)的生长量和生长倍散为考寨愈伤组织生长指标，所 得试样为6～12个平行试样的平均值。 3纛伤组织中生■■的摄取分离夏定性分析 生物碱的检测方法很多，包括TLC，HPLC，非水碱量法，中和漓定法，酸性染科法，毛细管电泳法等。本 实验用TIC和HPLC法对愈伤组织中总生物碱进行了定性鉴别。 3．1生物碱的提取分离愈伤组织干燥品研成粉末．95％乙醇，回流提取3次，过滤，合并滤液，回收乙醇取 萃取液，无水Na2S04脱水，回收氯仿，干燥得残渣(粗总碱)。 3．2 TLC定性鉴别层析条件：吸附剂：硅胶G：展开系统；甲苯一丙酮一无水乙醇一氨水(4：4：0．6： 0．04)；显色剂：改良磺化铋钾。 将样品、阳性对照品和标准品点于同一硅腔G板上，展开，取出，晾干，喷显色荆，自然干燥。结果表明： 在硅胶G板上样品与阳性对照品的位置上均显示出与标准品位置相同的橙红色斑点(图略)。 4野■粟息生桷奠的含■舅定 4．1材料来源将野羁粟愈伤组织在自然条件下干燥或在50U左右烘干，每次称取禽伤组织干燥品 5州}mg进行定量分析。 4．2仪器、试药、试剂 液5．9ml和O．2mol／L的己酸锵蓿藏14．Iml，棍合郾成。0．04％澳甲酚绿潜囊i精密称取long澳甲膏鼍，用 1029 Walpole缓冲液⑦溶解，定窑至25ml。 4．3测定方法采用酸性染料比色法。 5结暴与讨论 荨四种生长澈素(Growth 鲜重计算。在附加NAA的基础培养基上愈伤组织生长量与生长倍数最高。⑦生长激素与激动素组合对愈 伤组织生长的影响。 NAA，0．0mg／L的KT时，▲伤组织生长量与生长倍数为最高。 5．2碳源对盒伤组织生长及其次生代谢物产生的影响Sho／i 对大红墨粟愈伤组织生长的影响，其中最显著的是蔗糖。本文考查蔗糖对野罂粟愈伤组织生长的最佳用量， 蔗糖浓度为2．0％时，禽伤组粤{的生长倍数最高．其次是3．0％蔗糖，但后者愈伤组织生长状态比前者白嫩， 禽伤组织的总生物碱含量在3．0％蔗糖培养基中最高。 5．3蠢伤组织生长曲组 将愈伤组织接种在新鲜的培养基上，每隔5d取一次样，考查其生长量随培养时间的变化，野罂粟愈伤组 织的生长曲线呈s型，其生长周期一般为40d．其最佳接种期在30～35d之间。(参考文献略) ≮硫酸沙丁胺醇和茶碱对肉仔鸡生产性能的影响及生化机制研究 束爱民李鼻刚 橱晓峰(青岛市筠品检验所266071)