苏云金杆菌GC-91发酵溶氧地研究.pdfVIP

Issue 杀虫微生物专刊 武汉大学学报(自然科学版) Special ScienceEdition) Univ．(Natural 0ct．1998：59～61 1998年10月 J．Wuhan 苏云金杆菌GC一91发酵溶氧的研究 刘华梅’ 李 青 陈振民 吴继星 (湖北省农科院Bt研究与开发中心，武汉430064) 影响，以及该菌株的临界氧和发酵过程的溶氧状况，分析了该菌株的耗氧特性，确定了GC一9】发酵不同阶段的最佳 通气量，有效地改善了溶氧状况，大大提高了发酵水平． 关键词苏云金芽孢杆菌，溶氧，发酵水平 分类号Q936 1．2．2 苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis，Bt)是自动发酵罐发酵：德国贝朗公司生产的 一种好气性芽孢杆菌，氧气与它的生长密切相关．在 L。10 BIOSTAT—C15L发酵罐，分别装量8L，培养 菌体大量繁殖和芽孢形成期需氧量增加，如这时供 温度32℃。通气量设定为18～20L／rain，通过转速 氧不足，会导致菌体自溶或不形成芽孢，引起生产不 调节来控制溶氧水平，设定溶氧水平为15％，自动 可弥补的损失．许多资料表明，通气量的大小对苏云 测定并记录发酵过程各参数． 金杆菌的菌含量及芽孢和伴孢晶体的形成有很大关 1．2．3pH测定：采用IngoldpH玻璃电极． 系‘¨． 1．2．4形态观察：将被检样品常规涂片，石炭酸复 红染色，观察营养体，芽孢，晶体形态及大小等，判断 1材料和方法 芽孢形成率o]． 1．2．5发酵液菌数测定：百倍稀释培养计数法． 1．1材料 1．1．1菌种：BtGC一91，血清型7a7c，由瑞士 胶制备参照LaemmLi，电泳带用扫描仪扫入计算 Ciba—Geigy公司提供． 机，利用Image一1D软件分析晶体蛋白含量． 1．1．2培养基：1)斜面培养基：BP培养基；1．2．7生物效价测定：参考钟连胜等生物测定方 2)发酵培养基：主要成份为淀粉，豆粕，酵母粉．其 法‘“． 中发酵培养基A总含固体量为8．8％，B总含固体 量为7．12％(培养基各成分百分比同A)，C在A基 2结果与分析 础上补加葡萄糖，总含固体量为9．3％． 1．2方法 2．1摇瓶发酵实验结果 mL 1．2．1摇瓶发酵：配制发酵培养基，使用500 见表1，实验表明：通气量的大小对菌数，芽孢 mL mL，33mL，50 锥形瓶，采用25 3种装量，灭菌 形成率，发酵周期及晶体含量都有显著影响，装量越 消毒后，置旋转式摇床上振荡培养(转速220r／rnin， 少，通气量越大，发