Tween-80增强温热体外与体内抗肿瘤作用的研究.pdfVIP

膜系统、抑制线粒体内离子及细胞色素C的释放从而抑制凋亡的发生，Bax则与Bcl一2相对应，可 促进线粒体内细胞色素c的释放，促进细胞凋亡产生；一般认为Bcl一2、Bax主要分布于胞浆、内质 有胞核胞浆问分布的转换、作用34h，Bcl一2分布于胞浆，Bax主要分布于胞核。由于吐温80作用 于细胞质膜系统，可促进膜对离子的通透性【6]，而Bcl一2可抑制膜对离子的通透，因此Bcl一2 的表达增加及胞浆分布可能作为一种代偿机制与细胞内离子改变有关。有研究表明：Bcl一2及 Bax分布于细胞分裂问期的胞核内，其中Bcl一2可与染色质结合．但其生物学意义尚不明确[7]； 化疗药物作用于肿瘤细胞后，Bax表达增加及核膜上分布与laminA的降解、凋亡的发生有关[8]。 但其具体意义仍有待于进一步研究。 Tween一80增强温热体外和体内 抗肿瘤作用的研究 扬耀琴扬虎川 陶惠虹 同济走学医学院肿瘤细胞研究室200070 温热疗法特别是在与其他疗法如化疗合并应用时，对实体瘤具有有效的治疗作用①。为了提 高温热疗法的抗肿瘤效应和减少副作用，选择理想的合并药物是其关键。我们在细胞水平的一些 研究己显示细胞膜作用药物Tween一80与温热协同能有效地杀伤肿瘤细胞，并且对正常细胞较为 安全和低毒②。在本研究中，我们进一步探讨了Tween一80台并温热对小鼠实体瘤的抗肿瘤效应， 以及Tween一80与温热作用的协同机理。 材料与方法 l、1试剂药品：Tw 合物(DAKO)。 1640培养基中。指数生长期细胞经胰酶、EDTA消化， ∥砌青霉素和100p．吕／nd链霉紊的RPMI 收集于1640培养基中，台盼兰染色细胞存活力大于95％。 1．3实验动物：6—7周龄、雄性BALB／C小鼠(清洁级)．用于建立荷瘤鼠模型分段。 皿中37℃培养2小时，待细胞贴壁后，加^培养液20mt覆盖整个玻片。24小时培养后，细胞被随 0．1水浴中，加热60分钟)；合并组(细胞同Tween组处理后．于作用结束前，给予41℃加热处理)； 对照组(加入Hanks液，37℃培养)。 上述各组分别于加热处理后即时、换新鲜培养液继续培养4小时、72小时将长有细胞的玻片 c法染色。常规脱水、透明、封片。显微镜 取出．细胞经丙酮、甲醛(1：1)固定，经免疫组织化学AB 10 观察，并经MPV—lII显微分光光度计定量测定(波长490 nm，每组随机测定20～30个细胞)，团体 T检验分析。 X105 l-5肿瘤生长曲线：于小鼠后足掌皮下接种5 B16细胞、10天后，足部肿瘤可达到平均0． 5xO5cm2大小。荷瘤鼠被随机分为4组：1)温热组：小鼠被置于41℃士0 l水浴箱上，荷瘤足经 一有垫小孔插入深部的水浴中，加热100分钟；2)Tween组：小鼠经尾静脉给予Tween一80 200wl／ 组)：4)对照组：尾静脉给予Hanks液，正常喂养。用游标卡尺隔日测量足部肿瘤三径的变化，计 算肿瘤体积大小，根据肿瘤体积的变化绘制肿瘤生长曲线。 1．6荷瘤鼠的死亡率：小鼠经腹腔接种B16肿瘤细胞3 X104／只。接种后lO天，正如上述，小 鼠被随机分为4组。加热时，小鼠被垂直浸人4l℃水浴中直至小鼠胸部，加热60分钟(腹腔内达 到4l℃起计算)。处理后，小鼠继续正常喂养lO周，观察小鼠的存活和死亡情况。 I 理，然后由尾静脉接种4X105肿瘤细胞至每只小鼠，三周后，小鼠被引颈处死，解剖镜下计算两肺 所形成的B16黑色素瘤灶数(O．1ram3)。 结 果 2．1