用精原干细胞移植技术制作转基因动物地研究前景.pdfVIP

TH Symposium of the 5 International Conference on Transgenic Animals 目的蛋白分离或引起移植组织排斥的动物基 转入一个抑制基因(或一段抑制核酸序列) 即 因 其次 从现有成果看 体细胞克隆技术生 可以特异 精确而灵活地抑制某种内源基因的 产转基因动物的成功率已经超过了显微注射等 表达 但方法体系还远未成熟到应用于大家畜 常规技术[11] 并且克隆技术可以缩短生产周 转基因技术的程度 而只是比较有发展潜质的 期 并可以选择性克隆雌性细胞 并且将转基 基因技术 因动物的筛选从动物水平提高到细胞水平 节 4. 问题及展望 省了时间 降低了成本 而在生产转基因动物 目前 生产实践中动物乳腺生物反应器的 方面 采用体细胞核移植技术比用显微注射技 应用已崭露头角 但这项技术还存在着众多问 术具有更多的优点 体细胞的数量远远比受精 题 首先是研发周期长 前期投资大及技术难 卵丰富 而且打靶成功的转基因动物细胞可以 度高等 导致所有产品都未商品化 其次 有 冷冻保存 两项技术的结合 基本突破了动物 关转基因动物的基础理论研究还比较薄弱 另 转基因技术的发展屏障而又具有明显的生产优 外 乳腺生物反应器的异位表达和表达产物的 势 是未来动物乳腺反应器发展的必然趋势 泄露问题也需要各种新技术来解决 最后 人 2000 年 英国PPL 公司将人AAT 基因定点整 们出于对转基因产品安全性以及转基因技术所 合到胎儿成纤维细胞的á1 原胶原(Procollagen) 涉及的伦理道德问题的考虑 对转基因产品接 基因座位 而后进行核移植 生产出世界首例 受程度不高 这在一定程度上阻碍了乳腺生物 基因打靶绵羊 其乳中 AAT 蛋白含量达到了 反应器的发展 乳腺生物反应器这项技术还需 650mg/L 远高于显微注射法 18mg/L 的水平 要在众多方面加以改进 尤其是转基因动物生 [12] 据 Science 2002 年2 月报道 赖良学 产效率低和基因表达受“位置效应”影响这两大 等[13]用核移植方法获得了4 头敲除了á 1 3 技术瓶颈[17] 虽然核移植与基因打靶技术相 半乳糖苷酶基因的克隆猪 这两项研究成果虽 结合可消除转基因技术的发展屏障 但这两项 然并不完全采用“条件打靶 体细胞克隆”方法 高新技术还未完全成熟 尚存在着许多缺陷 但都是以体细胞核移植技术为支持平台 通过 [18 19] 成功的实例[12 13]证明 这两项技 基因打靶(敲除) 于细胞水平上操作处理的结 术正在不断完善和完美对接 最终将会为乳腺 果 其成功经验预示着这项技术的良好发展前 生物反应器的商品化铺平道路 并造福于人类 景 各种抑制内源基因表达策略如三级螺旋法 勿庸置疑 动物转基因正在改变农业 医药 反义 RNA 法(RNA 干涉法)和翻译抑制蛋白法 生物材料 甚至是整个生命科学的研究与发展 [14 15 16] 的出现 在某些层次上也为乳腺 面貌 生物反应器的研究提供了思路 这些方法只要 0138 Prospect of the establishment of transgenic animals by primitive spermatogonium transplan- tation (用精原干细胞移植技术制作转基因动物的研究前景) 吴应积, 罗奋华, 旭日干 内蒙古大学哺乳动物繁殖生物学与生物技术教育部重点实验室, 呼和浩特 010021