菊花倍半萜烯内酯诱导鼻咽癌细胞毒性与凋亡的研究.pdfVIP

菊花倍半萜烯内酯诱导鼻咽癌细胞毒性 和凋亡的研究。 椿忠宁1椭纯1‰胁rrIjn92 Yang曲喈埘0119 C}肿1一 (1中山医科大学公共卫生学院广州5100辨； 2 Medch Dep日rt0f岛|珊哪时，o∞u阻ti呻d衄dFh【rIi睁M曲cmP，FacLlI竹of 1175昕) h仰，Nmk岫lu而v“ty0fsLT韶pd弛SjrIgap。re Lacootls，sL)，其主 一些芳香类草本植物(如菊花)中含有倍半萜烯内酯(s唧iterpene 要生物话性成分之一是pal曲en01埘e(PN)，已有文献报道和美国专利局登记将PN用于 多种疾病(如发热、关节炎和偏头痛等)的治疗；最近的研究证实，PN能提高人乳腺癌细 胞对化疗药物(如paclitaxel)的敏感性【11；然而PN介导细胞杀伤作用的确切机制及其潜 carcinⅢla，NPc)在广东地区的发病率 在的抗肿瘤效应了解甚少。鼻咽癌(na30phaDmgeal 之高尤为突出，素有“广东瘤”之称，是广东省重点防治的恶性肿瘤之一，因此开展NPC的 化学预防(c}·∞∞pre珊tion)具有重要的意义。为探讨PN在NPc中的抗肿瘤作用，本研 究应用纯PN给予人鼻咽癌细胞株。忸1体外暴露进行细胞毒效应和捅亡观察。结果如 下： 1材料和方法 1．1细胞培养和处理 人鼻咽癌高分化细胞株(CNEl)由中山医科大学肿瘤研究所提供。在含10％胎牛血 000 BRL公司)的 清(FBS，H正‰d公司)、1U青霉素和100旭倒链霉素(P＆s，Gib。o RPMI (活性95％)置于37℃、5％Cq饱和湿度培养过夜至80％细胞融合。分组给予如下受 试物处理：阴性对照组加等量cM；阳性对照组为给放线菌素D(ActD，sigma，终浓度为5 ng／砒)；PN作 旭／mI)预处理30lTIin后加入肿瘤坏死因子一a(TNF．a，s蛳a，终浓度为15 的不同剂量组(其中DMs0终浓度均低于0．025％)进行剂量效应作用观察。各组按设计 分别作用不同时间后检测如下指标进行时间效应作用观察。 1．2细胞毒性指标检测 Leakage(％)】测定按shenHM等报道方法【…，用特 乳酸脱氢酶(U)H)漏出率[u)H 001369)和中华医学基金会(cMB)基全贷助谭 。国家自拣科学基金(N。、广东省自然科学基金(No ·233· 异性U)H诊断试剂盒(Abbott I．aboratoTies产品)在自动生化测定仪(AbbottvP)上测定。 2×1矿细胞置24孔培养板(NUNc公司)处理1～24 h后，取培养基100出用于测定漏出 纽胞外L工)H(E一Ⅱ)H)，然后用超声细胞破碎仪(Mic㈣“，美国)裂解细胞，离心后取 细胞增殖功能测定采用噻唑蓝颜色反应法(MTT法)略为改进_3】。105细胞置96孔 培养板(Nunc公司)处理，终止前4 mg／耐)继续培养，至加入细胞裂