精制人α干扰素口含片药效学实验地研究.pdfVIP

2．精制人a干扰素口含片药效学实验的研究 钱汶光沈富兵 周如娇 牵方仲 (卫生部成都生物制品研究所) 摘要本实验是对人d干扰紊口含片的药效研究，旨在通过小鼠口含使用 干扰索后其体内NK细胞活性变化和sIgA的水平井高以及直接用致孙性流感病 毒攻击小氧观察其保护作用三个方面的指标来验证干扰素通过口腔含服是否有 效以及效果如何． 实验一：精制人型干扰素口含片激活小鼠体匈NK细胞活性的宴验 本实验在于验证干扰素口含片激活小鼠体内NK细胞活性并与肌注途径对 照．结果证明，口腔舍服，可显著激活NK细胞活·}生，其活性的增强与剂量的 大小不呈正比关系，用小剂量就可以显著激活N＆细胞活·l生，增大剂量不增加 效果，小剂量延长给药时间更有效．在给药途径上证明，小剂量含服同大荆量 肌注具有相同的效果． 实验二：精制人a型干扰素口合片调节小鼠口腔粘膜s1g^的实验 本实验旨在检测正常小鼠在使用干扰素口含片后其口腔粘膜sIgA的升高 水平，以了解大小剂量干扰素对局部粘膜免疫的调节能力．实验结果证实．干 扰素直接作用于口腔粘膜，可显著提高谊局部的sIgA水平，比调节效果在用 药20天时迭高峰，并可维持至少30天．小剂量的维持效果同大剂量相近． 实验三：精制人c【型干扰素口含片在小鼠体内抗流感病毒实验 本实验分为预防保护实验和治疗保护实验两部分．预防实验是先用干扰素 给小鼠口含用药10天之后，以5倍半数致死量流感病毒鼠肺适应株攻击小鼠； 而治疗实验是先用病毒攻击，后给相同荆量的干扰素口舍6天．观察小鼠在攻 毒后的死亡·隋况至14天，求得生存率并与对照组和病毒唑比较．结果显示， 在预防实验中，干扰素口舍片抗流感病毒的保护率为62．5％，治疗实验中为 50％，预防较治疗效果好．与对照组比较均有显著差异；与病毒唑相比，预防 效果优于病毒唑，治疗效果与病毒口唑相当． 关键词干扰素口合片 NK细胞sIg^抗病毒作用 前 言 随着分子免疫学研究的快速发展，干扰素一类细胞因子的作用机制正在逐 步被阐明。口含干扰索的作用机制，主簧是干扰素通过与口腔粘膜的干扰素受 体相结合而起作用的。研究表明，人体的干扰素受体，主要分布在口腔、腭咽 及鼻腔粘膜部，只要少量的干扰素同上述部位的受体结合，即可发挥干扰素的 生物活性。 由于我们的干扰素口含片主要是用于预防和治疗流感感冒等上呼吸道病毒 的感染，因此，必需对实验的指标进行选择。大家知道，干扰素具有免疫调节、 抗病毒及抗肿瘤的功能，我们选择免疫调节和抗病毒两大功能作为实验的主要 内容。我们以全身性免疫指标NK细胞和局部粘膜免疫指标sIgA来反映干扰素 口含片的免疫调节功能，以抗流感病毒的保护效果来反映干扰素口含片的抗病 毒功能。通过这些指标来验证干扰素口含片在剂型改变、途径改变和剂量改变 之后其是否有效以及效果如何。 本实验值得一提的是实验中给药方法及剂量控制的探讨。经过反复论证和 筛选，我们发现使用粉剂口腔喷洒是口含片的最佳模拟和投药的最佳方式，用 定量药粉放入移液器吸头套入注射器口腔喷射能够较准确地控制剂量。实验也 证明这是非常有效的。 材料 1．实验动物：Balb／c小鼠，由华西医大实验动物中心提供，清洁级。 2．干扰素口含片：本所生产合格的精制人n型干扰素针剂(100万单位， 批号970306)，按所需干扰素含量及口禽片配方比例配制而成。 3．Yac—l细胞：购自华西医大免疫室。 4．0．01 96匹罗卡品注射液：购自华西医大免疫室。 5．流感病毒FMl鼠肺适应株：购自中国医学科学院医药生物技术研究所。 6．病毒唑注射液?湖北宜昌制药厂出品。 7．羊抗鼠IgA抗体：购自sigma公司 8．生物素标记羊抗鼠IgA抗体：购自sigma公司 9．标准品：购自Sigma公司 10．亲和素酶：购自Sigma公司 方法与结果 实验～：精制人n型干扰素1：3含片激活小鼠体内NK细胞活性的实验 1．干扰素药粉配制：按口食片配方和干扰素含量配制。 2．实验动物分组：随机分组，每组12只。 3．给药方法：依不同剂量和途径用药，其中