聚合物纳米胶束无损伤显像功能化初步研究.pdfVIP

∗ 聚合物纳米胶束的无损伤显像功能化的初步研究 † † ‡ 杨小强 高金明 帅心涛 †中山大学化学与化工学院， 广州市中港西路 135号 ‡美国Case Western Reserve University 生物医学工程系 ∗国家自然科学基金（批准号资助课题 关键词：聚合物纳米胶束 放射性标记 无损伤显像 单光子发射断层扫描 近年来，以聚合物胶束为载体的疏水性抗肿瘤药物的传输研究已经取得了 一些重大的进展，主要体现在药物的高效负载、高度靶向传输以及智能控制释放 等方面[1-4]。胶束的无损伤显像功能化是最近一、两年来才兴起的研究领域， 由于其潜在的重大应用价值，正迅速成为胶束载体研究中最热门的研究方向之 一。胶束载体显像功能化的一个途径是载体的放射性标记，检测手段包括无损伤 （non-invasive）的正电子发射断层扫描（PET）或者单光子发射断层扫描 （SPECT）。本研究以PCL-PEG 胶束为研究对象，成功地进行了胶束的放射性标记 并初步探讨了胶束注射后的SPECT 显像效果。本研究的目的之一是使胶束的体内 输送全过程原位可见，有利于深入研究胶束的体内循环、传输、组织及细胞作用 的过程与机理，促进聚合物胶束的合理化设计及应用；另一个较长远的目标是发 展以聚合物胶束为平台的纳米探针技术，实现对肿瘤的无损伤性早期诊断。 Scheme 1. Synthetic route to PCL-PEG-DOTA for preparing radio-labeled micelles. PCL-PEG 的合成及放射性标记实验路线见 Scheme 1。首先，参考文献报道 的方法，通过阴离子聚合反应合成了两种不同分子量及嵌段组成的单氰基聚乙二 醇（PEG）与聚(ε-己内酯)（PCL）的嵌段共聚物（OH-PCL1k-PEG3k-46%NC 以及 OH-PCL5k-PEG3k-32%NC）。PEG 段的分子量由MALDI-TOF-MS 法测得，PCL 段的分 1 子量则根据 Ｈ NMR图谱中PCL特征峰的吸收强度与PEG峰强度的比值计算所得， 1 通过 Ｈ NMR 图谱中聚合产物的氰基连接亚甲基质子在2.45ppm的三重吸收峰与 PEG 峰（3.65ppm）的强度比较，计算得到两种共聚物中带单NC 端基的聚合物分 子的摩尔百分含量分别为 46%和 32%。在加氢反应将端氰基转换为伯氨基时，为 了减少PCL 在加热条件下的水解，聚合物形成胶束水溶液后直接进行加氢反应， 其它反应条件与文献报道基本相同[5]。最后，通过DOTA-NHS 酯与聚合物的PEG 链端伯氨基的反应(条件：DMSO 中，室温反应 12h)，将DOTA 基团连接到聚合物 的PEG 链端。上述聚合物在pH5 的乙酸铵缓冲溶液中形成胶束后，加入3 倍摩尔 111 111 3+ InCl 并在室温搅拌2h，放射性离子 In 被包含于DOTA 的分子空穴内。 比的 3 胶束溶液中过量的InCl3 及其它小分子和离子通过离心半透膜过滤法（MCO = 10k） 除去[6]，在注射前，将胶束溶液浓缩到所需要的浓度（例如：20mg/ml）并按 0.9%盐浓度加入NaCl 后，TEM 及DLS 技术未检测到明显的尺寸变化，PCL5k-PEG3k 及PCL1k-PEG3k 胶束的平均尺寸分别为92 ± 11 nm 及37 ± 5 nm （DLS 数据）。 120 (b) (a) 100