乙酰乳酸合成酶相关基因MoILV通过参和氨基酸的合成从而调控稻瘟病菌的生长发育、无性繁殖及致病过程.pdfVIP

乙酰乳酸合成酶相关基因MoILV通过参与氨基酸的合成 从而调控稻瘟病菌的生长发育、无性繁殖及致病过程 杜艳，王佳妹，张海峰，郑小波，张正光’ (南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育郎重点实验事，南京210095) 摘要：稻瘟病菌(MagnaportheD删引起的稻瘟病是全球水稻生产上最重要的病害之一，其与水 稻的互作系统已成为研究植物病原真菌与寄主互作的理想模式系统之一，该病菌也是研究丝状致病 真菌生长发育及致病分子机制的重要模式生物。鉴定和分析稻瘟病菌的致病相关基因，对深入了解 稻瘟病菌的致病分子机制具有重要的意义，同时为寻找新的药物靶标，设计合理有效的稻瘟病菌防 治策略提供实验依据。 。 DNA插入突变是标记、鉴定功能基因的有效途径之一。农杆茵介导的转化(ATMT)在丝状真 茵遗传转化体系中具有效率高、成本低，操作方便和重复性好等多重优点。本研究采用ATMT方 码一个乙酰乳酸合成酶(ALs)。在白色念珠茵中，编码乙酰乳酸合成酶的基因尼砣、尼w均参与 亮氨酸0-七u)、异亮氨酸(tie)、缬氨酸(Val)三-种氨基酸的合成过程。根据同源序列比对，在稻瘟病茵 基因组数据库中搜索到另一个乙酰乳酸合成酶编码基因尼％的同源基因，命名为MolLV6。为阐明 ALS编码基因在稻瘟病茵的生物学功能，我们对MolLV2和MolLV6进行了深入的研究。 根据同源重组原理、采用原生质体转化方法分别获得了其敲除突变体Agoilv2和AMoilv6。对 突变体进行生物学性状分析发现，AMoilv2和AMoilv6突变体气生茵丝生长稀疏、茵落呈现黄色， 但生长速率及生物量与野生型比较无显著性差异；两个突变体均不能产生分生孢子梗和分生孢予， 调；两个基因缺失突变体均丧失了对水稻的致病能力，但茵丝尖端在诱导界面上仍能形成附着胞； 此外。突变体的胞外漆酶和过氧化物酶活性降低，突变体内编码胞外漆酶和过氧化物酶的基因转录 水平显著降低。进一步研究发现。基本培养基MM和产孢培养基SDC分别添加外源的Lcu、Val、 Ile三种氨基酸。MolLV2缺失突变体在生长早期毙观察到非常少量的分生孢子；而MolLV6缺失突 变体的产孢能力有所恢复，但产孢量仍显著低于野生型，且产生的分生孢子没有致病能力。研究还 控稻瘟病菌的生长发育、分生孢子梗及分生孢子的形成，同时，MoIlv2和Molly6通过参与调控 Leu、Val、Ile三种氨基酸的合成，从而调控无性繁殖和致病过程。 关键词：ATMT；乙酰乳酸合成酶；生长发育；无性繁殖；致病性 ’通讯作者：张正光，教授，博士生导师，E-mail：zhg／2aa蛾jau．edu．∞。