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菌 物 学 报 25 4 592~598, 2006 Mycosystema SEFA-PCR 法克隆灵芝鲨烯合酶基因启动子及其序列分析 李 娜 王世明 陈 军 李玉祥 赵明文* 南京农业大学生命科学学院 农业部农业环境微生物工程重点开放实验室, 南京210095 摘 要 鲨烯合酶是灵芝三萜生物合成的关键酶 灵芝鲨烯合酶基因的表达和活性的高低决定了灵芝中三 萜含量的高低 根据已经获得的灵芝鲨烯合酶全长cDNA 序列设计一对专一引物 通过PCR 扩增得到了 灵芝鲨烯合酶基因的基因组全长 序列长 1984bp 含有 3 个内含子 根据其基因组序列设计引物 采用 SEFA-PCR 的方法 以总DNA 为模板 克隆了灵芝鲨烯合酶基因的启动子序列 长1042bp 序列分析发 现灵芝鲨烯合酶基因启动子中没有明显的TATA 和CAAT 框 但是含有CCAAT-binding factor GATA-1 GC box TF D 等重要的转录因子的结合位点 以及在人和酿酒酵母鲨烯合酶基因启动子中发现的甾 醇调节相关的顺式调控元件