枸杞叶片DNA 不同提取方法比较.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAl1IluiA ．Sci．2009，37(15)：6872，6875 责任编辑 李占东 责任校对 汪伟 枸杞叶片DNA不同提取方法比较 思彬彬，尚洁，马艳辉 (北方民族大学生命科学与工程学院，宁夏银川750o21) 摘要 [目的]为研究枸杞的遗传多样性、种质鉴定和指纹图谱的构建提供基础保证。[方法]以枸杞成熟叶片为试材，分别采用常规 CrAB法、高盐CrAB法等 11种方法从枸杞中提取基因组 DNA，比较不同方法的提取效果。[结果]11种方法中，除5×CTAB法试验结果 不理想外，其余 l0种均能有效地从枸杞叶片中获得DNA，所提DNA的质量和产量均无明显差异。[结论]l1种方法提取的枸杞基 因组 DNA，能够满足 RAPD分析的需要 。 关键词 枸杞；成熟叶片；DNA提取 中图分类号 $567．19 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2009)15—06872—01 C呻叩aris0IlofDifferentExtractionMethodsofGemmlcDNA from Ⅱle 纽vesofLycium barbarum L． SIBin-binetal (Collegeofl,lfeScienceandEngineering，NorthernUniversityforNationalities，Yniehuan，Ningxia750021) O【bjective]11heresearchairn~toprovidebasicguaranteeforstudyingthegeneticdiversiytthegermplaseidentificationnadconstructionoffin— gerpfintofLyc／~ barbarumL．1MethodJWihtmatureleavesofLyci~ barbarumL．astestedmaterial，thegenomicnNAwasextractedfrom ㈣ bar． barum L．11si elevendifferentmehtods，suchas mehtod ，high-salt method andSOon．Iheextractioneffcetsofdifferentmehtodswere con— pa ．1ResultJHish—qualityDNAcouldbeobtainedwihttenofallmethods，except5×CrABmethod．QualiytnadouttputofDNAhadnosigniflcantdif- ferences．1ConclusionlThegenomicI)NAcouldbe extractde fromhtematurelaevesof Mrban~ L．by1lkindsofmehtods．rI11esemehtodsall couldbeusedinR D reaction． Keywords 知 barbamm L．；Maturelaeves；DNA extraction 宁夏枸杞(Lyci~ barbarumL．)为茄科多年生落叶灌 ⑦ 、③提取的基 因组 DNA纯度均较好，A~o／A2so在 1．80左 木_lj，主要分布在宁夏、内蒙古、新疆等省的干旱和半干旱地 右 ，说明DNA中不含蛋白质；而方法④、⑨ 、⑩、⑩A猢／A280小 区，具有很强的耐盐和耐旱性_2J。宁夏枸杞由于其组织细胞 于1．70，表明有蛋白质、苯酚、多糖多酚类等杂质存在，影响了 中含有大量的多糖、多酚及其他次生代谢产物，一般方法所提 DNA纯度；方法①、⑤A260／A28D大于 1．9，表明DNA中RNA或 取的DNA质量较差。笔者主要采用常规 CFAB法、常规 SDS DNA已降解。根据估算的DNA浓度，基本表现与纯度相符。 法、改良的CTAB、改进的SDS法等 l1种方法 ，对宁夏枸杞叶片 表 1 11种方法提取枸杞叶片 DNA的纯度和浓度 DNA进行提取，目的在于筛选出更适合于枸杞叶片基因组提 卫Ible1 ThepurityandeonomtrafionofDNA extractedfrom Lyc／um bar-