新型羟磷灰石涂层的聚乳酸支架体外细胞相容性研究.pdfVIP

浙 江创伤外科 2013 年 2 月第 18 卷第 1 期 ＺＨ Ｊ Ｊ Ｔraumatic ，February 2013 ，Ｖol.18 ，Ｎo.1 19 · · ·基础研究 · 新型羟磷灰石涂层的聚乳酸支架 体外细胞相容性研究 朱俊锋 黄 鑫 师钟丽 【摘要 】 目的 研究新型的用固定化尿素酶的方法制备的 羟基磷灰石／ 聚乳酸 （ＨＡ ／ ＰＬＬＡ）复合材料的生物相容性和成骨活性 。 方法 ＭＧ６３ ＨＡ ／ ＰＬＬＡ ＰＬＬＡ ２ ４ ６ ＭＴＴ 将成骨样 细胞种植在 和 （对照材料 ）三维支架材料上 。 在培养 ， 和 天后通过改良的 法检测细胞在材料上的增 殖情况 ；用 ｐＮＰＰ 磷酸酶检测试剂盒测定 ＡＬＰ 含量来评估成骨样细胞在材料上的分化情况 ；在培养 ４ 天后用扫描电镜观察细胞在材料上的形 貌变化 ；用 ＲＴ－ＰＣＲ 检测磷酸酶 （ＡＬＰ ），骨钙素 （ＯＣ），１ 型胶原等基因变化情况 。 结果 在培养 ２ 天和 ４ 天后 ，ＨＡ ／ ＰＬＬＡ 材料上的细胞数量 要明显多于 ＰＬＬＡ 材料组 ，说明相对于传统的 ＰＬＬＡ 材料 ，ＨＡ ／ ＰＬＬＡ 材料更能促进成骨细胞的增殖 。 电镜结果提示 ，在培养 ４ 天后 ＨＡ ／ ＰＬＬＡ 材料上的 ＭＧ６３ 细胞铺展在材料孔壁表面 ，提示细胞具有良好的活力 ，而 ＰＬＬＡ 组的细胞表现为圆球形 ，未见明显的细胞伪足形成 ，其形态明 显不及 ＨＡ ／ ＰＬＬＡ 材料组 。 ＡＬＰ 检测结果提示 ，ＨＡ ／ ＰＬＬＡ 组的细胞具有更高的 ＡＬＰ 活性 。 ＲＴ－ＰＣＴ 结果也提示 ，ＨＡ ／ ＰＬＬＡ 组具有更高的 ＡＬＰ 和 ＯＣ 基因表达 ，提示 ＨＡ ／ ＰＬＬＡ 材料更能促进成骨细胞的分化 。 结论 通过固定化尿素酶的方法制备的新型羟基磷灰石 ／ 聚乳酸材料相比 传统的 ＰＬＬＡ 材料更能促进成骨细胞的增殖和分化 ，提示该材料是一种良好的骨组织工程支架材料 。 【关键词 】 固定化尿素酶 ；羟基磷灰石 ；生物活性 ；ＭＧ６３ 【中图分类号 】 R318.08 【文献标识码 】 Ａ doi ：10.3969/j.issn.1009-7147.2013.01.008 Research on the in vitro cell biocompatibility of the newly hydroxyapatite / poly lactic acid composite material scaffolds ZHU Junfeng, HUANG Xin, SHI Zhongli. Suichang Peoples Hospital, Zhejiang 323300, China 【Abstract 】 Objective To investigate the biocompatibility and osteogenic capability of h