吡拉西坦和相关物质的高效液相色谱法分离研究.pdfVIP

吡拉西坦及相关物质的高效液相色谱法分离研究 朱广一梁奕昌’马晓国 (广东工业大学分析测试中心广州 510090) 1前言 吡拉西坦(脑复康)是一种重要的脑代谢改善药物，广泛用于治疗记忆和思维障碍”1。 对原料药物的分析多采用凯氏定氮法o’。此法操作繁琐，耗时长．并且由于合成物系中少 量a．吡咯烷酮和a．毗咯烷酮乙酸甲酯的存在而影响定量的准确性。国外有文献介绍用Gc 法01或}IPLc法”钡0定吡拉西坦，但国内尚未有此类报道。本文对吡拉酲坦及相关物质 和内标物间氨基苯甲酸的分离进行优化，建立了测定吡拉西坦的高效液相色谱系统。 2实验部分 2．1 仪器 高教液相色谱仪：岛津Lc，6A型，配sPD—6Av紫外检测器，c—R3A数据处 理器，心omasiI i．d．)。csF-lA超声波发生器(杭州无线电厂)。 C18柱(200哪×4．6mm 2．2试剂吡拉西坦、a-吡略烷酮、口-吡咯烷酮乙酸甲酯和间氨基苯甲酸为化学纯， 甲醇、磷酸和四氢呋喃为分析纯。 2．3储备液的配制准确称取毗拉西坦、d．吡咯烷酮、a．吡咯烷酮乙酸甲酯和间氨基 苯甲酸各50mg，用甲醇溶解后分别转移至25mL容量瓶中．以甲醇定容。配制成质量浓 度为29，L的储备液。 2．4分离条件的优化分别移取上述储备液各O．5mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇定 uL。 容。配成质量浓度0．19，L的混合溶液。依次改变所需选择的色谱条件，分别进样10 3结果与讨论 3．1 甲醇浓度对容量因子的影响(见图1)流动相中甲醇的浓度直接影响流动相对各组 分的洗脱能力。综合考虑分离度和分析时间，本文控制流动相中甲醇含量为20％。 ． 3．2 pH值的调节作用用磷酸调节流动相的pH值，在clI柱上进行分离，结果见图2。 在pH3．O“．0范围内，吡拉西坦、口-吡咯烷酮和口．吡咯烷酮乙酸甲酯都能很好地分离， 而内标物问氨基苯甲酸为弱酸性物质，随流动相酸度的增加，其离解受到抑制，容量因子 t’增大。根据实验结果，选择以磷酸调节流动相pH值为4．0。 3．3柱温对容量因子的影响(见围3) 随柱温的升高，组分保留时间减少，但高温上测 量的重复性和柱子耐久性下降，故本文选择柱温为45℃。 3．4流速对容量因子的影响(见图4)测定毗拉西担及相关物质在不同流量下容量因 牛 子。据此选择流量为1mI向in。 弓 3．5四氢呋哺浓度对容量因子的影响(见图5) 在流动相中加入少量四氢呋喃，可使流 动相的总溶剂强度增加，使样品的分析时间缩短。据图5显示实验结果，选择四氢呋喃浓 度为1％。 4结论 综上所述，分离吡拉西坦及相若物质的最佳色谱条件：流动相为矿(甲醇)：y(水)：矿(THF) =20：79：l，口H4-0；柱温为4S℃；流速为lmL，min。 ·通讯跃系人 一215． 6 3 O 3 4 5 6pH 甲醇(％) 围1 甲醇浓度对容量因子的