2015高考生物《酵母细胞的固定化》ppt复习课件.pptVIP

* * 课题 3 固定化酶 1．原理 酵母细胞的固定化 将酶固定在不溶于________的载体上，使酶既易催化反应， 又易于回收，可以重复使用 。 水 2．应用实例——生产高果糖浆 (1)反应机理：葡萄糖 ――→ 果糖。 (2)固定化酶反应柱 异构 颗粒状 生产成本 ①构成过程：酶固定在一种____________载体上，再将这 些酶颗粒装到柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。 ②特点：酶颗粒无法通过小孔，反应溶液可以自由出入。 (3)生产过程 葡萄糖 (――――→)反应柱 (――――→)果糖 (4)反应柱优点 ①能连续使用半年，大大降低了________________。 ②提高了果糖的产量和质量。 上端注入 下端流出 葡萄糖______酶 固定化细胞技术 1．概念 固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或________的方法 将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 化学 2．方法 (1)包埋法：将酶或细胞包埋在细微网格里。 (2)化学结合法：将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到 ________上。 载体 (3)物理吸附法：将酶吸附到载体表面。 3．制备固定化酵母细胞的过程 CaCl2 酵母细胞的活化―→配制________溶液―→配制海藻酸钠 溶液―→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合―→固定化酵母细胞 需要 不需要 不需要 营养 物质 包埋法固定化 化学结合法固 定化、物理吸附 法固定化 — 制作 方法 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺 高岭土、皂土、 硅胶、凝胶 — 常用 载体 一系列酶 一种 一种或几种 酶的 种类 固定化细胞 固定化酶 直接使用酶 直接使用酶、固定化酶及固定化细胞的比较 成本低、操作容易 ①既能与反应物接 触，又能与产物分 离；②可以反复利用 催化效率高、耗能 低、低污染 优点 反应物不易与酶 接近，尤其是大分子物质，反应效率下降 不利于催化一系列 的酶促反应 ①对环境条件非 常敏感，易失活 ②难回收，成本 高，影响产品质量 缺点 小分子物质 各种物质(大分子、 小分子) 各种物质(大分 子、小分子) 反应 底物 一系列 单一 单一或多种 催化 反应 固定化细胞 固定化酶 直接使用酶 续表： 处于中心的细胞容易缺氧而受到损害，同时， 反应原料不易进入到这些细胞之中 包埋法 细胞 需要改变酶的某些结构(基团)，酶的催化作用 受到一定程度的影响 结合法 将酶吸附在不溶于水的载体上比较困难，同时 酶也容易从载体上脱落 吸附法 酶分子一般相对较小，容易从大分子有机物网 格中逸出；如果反应物分子较大，则不易进入 网格中与酶接触 包埋法 酶 操作缺陷 常用方法 酶、细胞固定化的方法 制备固定化酵母细胞的实验注意事项 1．酵母细胞的活化 (1)酵母细胞需要的活化时间较短，一般需要 0.5～1 h，需 要提前做好准备。 (2)酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积 足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。 2．海藻酸钠溶液的浓度 海藻酸钠溶液的配制是固定化酵母细胞的关键： (1)如果海藻酸钠溶液浓度过高，溶液黏度增大，滴加时阻 力很大，将很难形成凝胶珠； (2)如果浓度过低，滴加时球粒难以控制，形成的凝胶珠所 包埋的酵母细胞的数量少，都会影响实验结果。 3．海藻酸钠溶液配制的注意事项 (1)对海藻酸钠溶化时要小火间断加热，避免海藻酸钠发生 焦糊。 (2)将溶化后的海藻酸钠先冷却至室温，再与已活化的酵母 细胞混合，避免高温杀死酵母细胞。 (3)固定化酵母细胞时，应将海藻酸钠酵母细胞的混合液用 注射器缓慢滴加到 CaCl2 溶液中，而不是注射，以免影响凝胶 珠的形成。 4．CaCl2: 使海藻酸钠胶体发生聚沉，形成凝胶珠。 固定化酶和固定化细胞技术 【例 1 】下列对固定化酶和固定化细胞的说法错误的是 ( ) A．固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将 酶或细胞固定在一定空间内的技术 B．固定化酶和固定化细胞技术包括包埋法、化学结合法 和物理吸附法 C．一般来说，酶更适合采用包埋法固定化，而细胞多采 用化学结合和物理吸附法固定化 D．包埋法常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸 纤维素和聚丙烯酰胺等