原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
2005年北京地区肝病感染年会论文汇编一大会发言
JAK-STAT通路在d一干扰素抗乙型肝炎病毒中作用的研究
张权魏来王燕
北京大学肝病研究所北京大学人民医院
生率比普通人群高100倍[1】。因此HBV感染仍然是威胁人类，尤其是我国人民健康的一个严重问题。
必要对其抗皿v机制做深入研究，以便提高其治疗效率和遴选新的抗病毒药物。本研究中，我们从信号转导机
制探讨了a—IFN的抗HBV作用。
材料和方法
1．1主要试剂Trizol
modified me—
碳酸酯(DEPC)购自瑞士Fluca公司，胎牛血清购自美国Hyelone公司，Dulbecco’SEagle’S
researchinstitute。
III、Taq
染料木黄酮、ISGF3Y多克隆抗体、0一actin多克隆抗体和羊抗兔二抗购自美国Santa
定量试剂盒和ECL化学发光试剂购自瑞士Pierce公司。
1．2主要仪器荧光定量PCR仪LightCycler
100PeltierThermal
公司产品，台式高速离心机Micromax为德国IEC公司产品，PTC CyclerPCR仪为美国
MJResearch公司产品，凝胶自动成像系统GELDoc2000为美国BioRad公司产品，恒温气浴摇床为哈尔滨东
明医疗仪器厂产品，二氧化碳培养箱3111为美国ForQm
non
气净化工程公司产品，高压灭菌蒸锅MLS一3000为日本SANYO公司产品，酶标仪Reader230s为荷兰DRGA
Teknika公司产品。电泳仪D．|『1『一III为北京六一仪器厂产品。
1．3细胞培养Hep
％胎牛血清眦M培养基中。生长到一定密度后按1×106接种到6孔板内，予含10001U／mlIFNa～2b的新鲜培养
基培养。染料木黄酮处理时，先用0．2mg／ml的染料木黄酮作用后再加入i000IU／ml的IFNn一2b。在药物处理
h
后0、I、2、4、8、12、24、48、72、9610个时点收集细胞上清、总RNA和蛋白质。
1．4RT—PCR 根据互联网生物信息资源辅助设计引物 引物序列为：STAT2～Sense5’
CGACCAGAGCCATTGGAGGGCG3’，STAT2一Anti5’TCATCTC Sense5’
STATl-Anti
GGCAGACCCCAGACCGACCA3’．
5’ GAACTGTGCTGTCGCT se5’
GCAGGGCACGCTG3’，ISGF3Y—Anti
CTTGCCAGACACGTGTTTCCGC3’，OASl—Anti5’TGGAGCGAACTCA 5’
Sense
AGGcAGTTAGTcC”TAT3’．PER-Anti5’GCGATTTGAACGTATAGA3’：Actin
Actin—anti u
5’GcTGGAAGGTGGAcAGc“3’。Trizol--步法提取细胞总f{NA，取2g细胞总RNA为模板，以0．
5 u u u
g／20 l体系01igo(dT)．。为引物进行逆转录。行PCR反应时，取ll逆转录得到
文档评论（0）