多元PCR在黑鲍微卫星遗传的研究中的应用.pdfVIP

多元PCR在黑鲍微卫星遗传研究中的应用冰 2 2 黎中宝1一Sharon NicholasGElliott A．Appleyard (1． 集美大学水产学院福建厦门361021) CSIROMarine Box1 (2． Research，GPO538，Hobart,Tasmania 7001，Australia) 摘要：多元PCR(MultiplexPCR)是～种在同一个反应中同时扩增两个或多个位点的聚合链式反应。根据1)03 等十一个微卫星引物单位点PCR扩增时优化的扩增条件(退火温度、MgCl2等)、十一个微卫星引物所带有的荧光 绿色；2．23：兰色；1．24：黄色)．多元PCR是～种快速和方便的研究方法。它不仅能有效地节省大量的时间、实验室的 经费支出和大大地提高了微卫星检测仪器的使用效率而且还可以提高实验效果。 关键词： DownPCR 微卫星，黑鲍，多元PCR，Touch 中图分类号 复(Simplesequencerepeats，ss飚)、简单序列长度多态性(Simplesequencelength tandem 和短串联重复(Short repeats，STSs)。由于微卫星具有高度多态性和等显表达的特点，它被广泛 and and 应用于遗传学、生态学、进化生物学和保护生物学之中(o’CouneHWright,1997；Jarne et aL，1994)、家系 Lagoda，1996)。在渔业生物学研究中，微卫星已广泛应用于研究种群结构(Nielsen et et et 分析(LiaL，2003)、数量性状(JacksonaL，1998)、种群的有效大d,(EvauaL，2004)、种群的鉴 and et 定(ShakleeBentzen，199s)、内交水平(Tessierat,1997)等。 PCR)是一种在同一个反应中同时扩增两个或多个位点的聚合链式反应。这 多元PCR(Multiplex 个方法不仅成功地应用于DNA分析的许多领域(Chamberlain et et aL，2000)、细菌(HendolinaL，1997)和寄生虫的鉴 1994)而且还成功地应用于病毒(Markoulatos et 定(HarrisaL，1998)。由于微卫星检测仪器的限制和优化多元PCR条件的复杂性，在许多实验室多 et 元PCR的使用受到限制。虽然多元PCR已用于一些鱼类(NeffetaL，2000；O’SeinyaL，1996)的微 et et aL，2000；Li 卫星遗传研究中，目前在鲍鱼(Huang a1．，2004)、有些鱼类(周莉等，2001；杜长斌等， PCR)。 2000)署n虾类(徐鹏等，20